PPG - Bioprodutos e Bioprocessos
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Navegando PPG - Bioprodutos e Bioprocessos por Orientador(es) "Ribeiro, Alessandra Mussi [UNIFESP]"
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- ItemSomente MetadadadosEfeitos de frações isoladas do veneno da formiga dinoponera quadriceps (kempf) em modelo de crises convulsivas induzidas por bicuculina em camundongos(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2019-02-25) Freitas, Francisca Rayanne Da Silva [UNIFESP]; Ribeiro, Alessandra Mussi [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Natural products are recognized as therapeutic tools for treating several diseases since ancient civilizations. In this context, animal venoms and their isolated components have shown great biotechnological potential, because these substances can be neuroactive with high affinity and specificity by nervous tissue in invertebrates and vertebrates. Thus, poisons can be used as instruments that help in the understanding of neuropathological alterations that occur in the human’s brain, such as epilepsy. Epilepsy is a neurological disorder that affects millions of individuals worldwide, and despite of the therapeutic advances many patients develop pharmacoresistance. It is inequivocal the need for the development of new substances that can be used as drug-model for new antiepileptic drugs. Previous studies have shown anti- and convulsant effects of the venom of the ant Dinoponera quadriceps. The aim of this study was to isolate the fractions of the D. quadriceps venom and to evaluate the neuroprotective potential on seizures induced by bicuculine (BIC) in mice. Crude venom was fractionated by high performance liquid chromatography (HPLC) resulting in 68 fractions (referred to as DqtxII-1 to 68). Male Swiss mice (3 months) were implanted with a cannula in the lateral ventricle. After the recovery period, animals were previously microinjected with saline solution (saline, n = 11) or each fraction (n = 114), afterwards each animal was observed in an open field (20 min). For the evaluation of the neuroprotective activity, after 30 min the animals of the BIC group (saline x BIC, n = 9) and fractions (Dqtxs x BIC, n = 111) were microinjected with bicuculline (10 mg/mL) and observed in CA (20 min). Our main results showed that there was not significant difference in the exploratory, grooming and immobility behaviors in mice treated with Dqtxs. Regarding the anticonvulsive activity, DqtxII-7 treated animals showed high latency to appear of the seizures (971 ± 164 s) when compared with BIC group (252 ± 91 s, p = 0,007). Further, this fraction protected 71% and 86% of animals against seizures and death, respectively. Thus, new studies are needed to determine the its structure and mechanism of action.
- ItemSomente MetadadadosEfeitos neurobiológicos do tratamento com sakuranetina em camundongos.(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2019-09-27) Silva, Wilson Vicente Da [UNIFESP]; Ribeiro, Alessandra Mussi [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)It is recognized that extracts and substances obtained from natural products, such as plants and animal venom, can contribute to the development of model drugs. The use of medicinal plants for the treatment of various is the oldest and most traditional form of therapeutic model in different civilizations. Brazil has a vast plant biodiversity, resulting in a wide heterogeneity of bioactive chemicals that can be isolated and used for medicinal purposes. Many molecules isolated from plant extracts can have pharmacological effects on different biological tissues, such as antioxidant and neuroprotective action on nervous tissue. In this context, sakuranetin (SAK) is a plant-isolated flavonoid, and previous studies have shown that this compound has antiparasitic, anti-inflammatory and antioxidant activity. Thus, the aim of the present study was to investigate the potential anxiolytic and anticonvulsant effects of acute administration of SAK in mice. For this study male Swiss mice (3 months) were used. For the analysis of the effects of SAK administration, the animals received intracerebroventricular (i.c.v.) administration of SAK at 1, 10 or 20 mg/kg (SAK1, SAK10 or SAK20, respectively) doses and the behavior was evaluated in the open field test (CA, 20 min), and immediately after the animals were submitted to the elevated plus-maze test (LCE, 5 min). Anticonvulsant effect was evaluated, thus SAK (1 or 10 mg / kg, i.c.v.) was previously administered in mice and after 30 min was injected with bicuculline (BIC, 1 mg/kg). Our main results showed that animals treated with SAK1 and SAK10 traveled a greater distance and higher speed (p < 0.05). In addition, SAK10-treated animals increased the entries frequency in enclosed arms compared with control animals (p < 0.05). SAK10-treated animals increased latency for first seizure (p < 0.05), survival percentage (p < 0.05) and percentage of time between time to first seizure and death (p < 0.05). Taken together, these results suggest that acute treatment with low dose SAK promotes hyperlocomotion (1 mg/kg), and high dose (20 mg/kg) induces anxiogenic effect in animals. Furthermore, intermediate dose (10 mg/kg) induces anxiety-like and hyperlocomotor behavior in animals, but there is anticonvulsant effect. Our next steps involve performing immunohistochemistry analysis to understand what brain areas are active during these behaviors and after investigate action mechanism involved in anticonvulsant effect.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Investigação do efeito da administração de melitina em um modelo de crises convulsivas em ratos(Universidade Federal de São Paulo, 2020-07-16) Soares-Silva, Beatriz [UNIFESP]; Ribeiro, Alessandra Mussi [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/7373640456805525; http://lattes.cnpq.br/8095426379200980; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)A epilepsia é uma doença neurológica crônica caracterizada por uma hiperatividade anormal dos neurônios que geram impulsos nervosos recorrentes, espontâneos, paradoxais e sincronizados, podendo ou não produzir crises convulsivas. Esse transtorno neurológico é um dos mais comuns e afeta aproximadamente 70 milhões de indivíduos no mundo. Cabe ressaltar que cerca de 30% dos pacientes desenvolvem farmacorresistencia em relação aos antiepilépticos disponíveis na clínica. Ademais, o uso desses fármacos pode estar associado ao surgimento de efeitos adversos graves. Estudos têm mostrado o potencial terapêutico de substâncias bioativas isoladas a partir de produtos naturais no tratamento de doenças do sistema nervoso. Por exemplo, compostos isolados a partir de venenos de artrópodes contem neurotoxinas que apresentam afinidade por estruturas moleculares do tecido nervoso, podendo agir em receptores, transportadores, canais iônicos dependentes de ligante e de voltagem localizados na membrana neuronal ou glial. Nas últimas décadas com o aprimoramento de técnicas de isolamento e síntese de compostos isolados de venenos ocorreu um aumento no número de pesquisas com foco no desenvolvimento de novos fármacos. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi investigar os efeitos neuroprotetores da administração de melitina (MEL) intracerebral em ratos submetidos ao modelo de crises convulsivas induzidas por bicuculina (BIC). Para isto, ratos Wistar machos (3 meses) foram submetidos a cirurgia para a implantação de cânula unilateral no ventrículo lateral e após o período de recuperação receberam previamente uma microinjeção de solução salina (Grupo controle, NaCl 0,9%) ou MEL (Grupo tratamento, MEL 0,1 mg/por dose). Primeiramente, os animais foram avaliados em um campo aberto (CA) por 20 min e em seguida submetidos ao teste de labirinto em cruz elevado (LCE) por 5 min, e os comportamentos dos animais foram registrados através de filmagem para posterior análise comportamental. Para a avaliação da atividade anticonvulsivante os animais receberam previamente salina ou MEL, e após 30 min os animais receberam microinjeção de BIC (10 mg/ml) e novamente foram observados no CA (20 min). Nossos principais resultados mostram que a administração de MEL provocou um efeito hiperlocomotor nos animais quando avaliados no LCE, além de aumentar o tempo de latência para a primeira crise convulsiva e proteger 90% dos animais de crises tônico-clônicas induzidas pela BIC. Tomados juntos nossos resultados sugerem que a MEL apresenta potencial anticonvulsivante, entretanto, mais pesquisas são necessárias para elucidar seu(s) mecanismo(s) de ação.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Nanoencapsulação de Quercetina e Sakuranetina em sistema nanoemulsionado(Universidade Federal de São Paulo, 2022-06-30) Santos, Beatriz Mendes [UNIFESP]; Ribeiro, Alessandra Mussi [UNIFESP]; Ottoni, Cristiane Angélica; http://lattes.cnpq.br/9620122455708223; http://lattes.cnpq.br/7373640456805525; http://lattes.cnpq.br/2258760614059977; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)A inflamação é uma resposta do corpo à patógenos ou lesões que culmina em um processo complexo de alterações em tecidos. Uma diversidade de doenças está relacionada ao processo inflamatório existem dois grupos de fármacos utilizados no tratamento de inflamações, os anti-inflamatórios esteroidais ou glicocorticoides e os não esteroidais, ambos atuam no encerramento dos processos inflamatórios, porém causam diversos efeitos adversos nos pacientes que os utilizam. Diante disso, é inquestionável a necessidade do desenvolvimento de novas substâncias para o tratamento de processos inflamatórios uma das fontes de obtenção de novas moléculas, são as plantas que possuem diversos constituintes químicos com comprovada atividade biológica. Os flavonóides são uma classe desses compostos químicos que possuem diferentes atividades farmacológicas incluindo a atividade anti-inflamatória. Estudos recentes têm sinalizado que os flavonóides quercetina (QU) e a sakuranetina (SAK), presentes na espécie Baccharis retusa, possuem atividade anti-inflamatória in silico, in vitro e in vivo. Contudo, QU e SAK possuem baixa solubilidade em água por conta disso são quimicamente instáveis, termo sensíveis e susceptíveis a oxidação, o que impede sua administração oral in vivo, e, consequentemente, dificulta a sua utilização como um fármaco anti-inflamatório. Assim, para melhorar sua biodisponibilidade e explorar o seu potencial biotecnológico, é necessário encontrar alternativas para melhorar as características físico-químicas destes flavonoides. Neste sentido, a nanotecnologia é uma alternativa para sanar esta problemática, de acordo com a literatura, a nanoencapsulação da QU em sistemas nanoemulsionados potencializou a sua biodisponibilidade, as nanoemulsões viabilizam a administração de um fármaco de baixa biodisponibilidade e possibilitam o aumento da solubilidade de ativos insolúveis em água, o que favorece o uso de soluções hidrofílicas. O objetivo deste estudo foi preparar duas nanoemulsões lipídicas uma contendo QU de fonte vegetal (QUve) e outra SAK de origem vegetal, com o intuito de aumentar a biodisponibilidade e solubilidade em água destas substâncias. As características físico-químicas analisadas foram tamanho, volume e intensidade analisados por espalhamento de luz dinâmico (DLS). Para os flavonoides nanoencapsulados foi avaliado um protocolo para maior eficiência destes sistemas. Para realizar a nanoencapsulação foram produzidos lipossomas à base de lecitina e QU diluída em etanol, acetona e acetona:etanol (60:40 %, v/v) e SAK diluída em acetona. Após a síntese foram realizadas sonicação ou extrusão, para a obtenção dos lipossomas. Foram realizadas as analises físico-química das partículas produzidas, em seguida foram realizados ensaios para avaliação da atividade antioxidante. Os resultados demonstraram que acetona é o solvente padrão e que a extrusão possibilitou a obtenção de lipossomas de menores tamanhos (100 a 1000 nm) para a QU. A produção da SAK vegetal nanoencapsulada (SAKveNE) não mostrou tamanhos de partícula na escala nanométrica. A avaliação da atividade antioxidante mostrou que o nanoencapsulação aumentou a atividade QU quando comparado aos flavonoides livres, sem nanoencapsulação, sugerindo que a liberação controlada pelos lipossomas favorece uma maior atividade antioxidante.