Navegando por Palavras-chave "Antibody formation"

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    Estudo comparativo de protocolos de imunização gênica: eletroporação aumenta consistentemente a resposta imune humoral
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2008-03-26) Parise, Carolina Bellini [UNIFESP]; Han, Sang Won [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Gene immunization may bypass some difficulties found with protein immunogen, such as the obtainment of purified antigen and the immune response reactivity to its native conformation. Thus, antigen encoding DNA inserted into a vector is inoculated into animal and the protein expressed in vivo with the appropriate three-dimensional structure stimulates the production of specific antibodies. However, the gene immunization methods may determine the efficacy of DNA vaccine. The present study compared four protocols of DNA immunization, using three different antigens: two of them phylogenetically conservative, human vascular endothelial growth factor 165 (hVEGF165) and human fibroblast growth factor-2 (hFGF-2), and other from vegetal origin, Kunitz-type serine protease inhibitor from Bauhinia bauhinioides (BbKi). For this, Balb/c mice were immunized with plasmid DNA encoding hVEGF165, hFGF-2 or BbKi genes. In the first protocol, animals were immunized by intrasplenic (i.s.) pathway; in the second, intramuscularly (i.m.); in the third, i.m. injections were followed by electroporation (ep); and in the fourth, i.m. injections followed by ep were performed in animals pre-immunized with antigen-transfected cells. Sera were analyzed by ELISA to detect the presence of anti-hVEGF165, -hFGF-2 or -BbKi antibodies. Results showed that i.s. immunization did not elicit detectable humoral immune response in our conditions. On the other hand, statistical analyses revealed that the ep improved the immune response to i.m. immunization and that three DNA immunizations followed by ep elicited the same effect obtained by two i.m. immunizations followed by ep in pre-immunized animals with antigentransfected cells. Our results showed that all protocols worked similarly for the three studied antigens and that i.m. gene immunization followed by ep was the more advantageous protocol. In addition, the immune response to i.m. immunization followed by ep was comparable to that obtained by protein immunization. Finally, these data allowed us select an efficient DNA immunization protocol that makes possible the antibody obtainment in the lack of purified protein.
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    Resposta imune celular e humoral dirigida contra antígenos do Clostridium tetani e do vírus do sarampo
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2008) Viana, Patrícia Oliveira [UNIFESP]; Moraes-Pinto, Maria Isabel de [UNIFESP]
    Objetivo: Padronizar um método para avaliação in vitro da resposta imune celular contra o Clostridium tetani e o vírus do sarampo e avaliar a resposta imune celular e humoral em indivíduos com diferentes tipos de exposição a esses antígenos. Métodos: Foram avaliados 19 adultos sadios vacinados contra sarampo (SV); 20 adultos sadios com história de infecção pelo vírus do sarampo (SD); 20 indivíduos sadios com vacinação contra o tétano em dia (TD); 20 indivíduos sadios vacinados contra o tétano, mas sem reforço nos últimos dez anos (TN). A resposta imune celular foi realizada através da marcação de IFNy intracelular em células TCD4+ e TCD8+ por citometria de fluxo, após estimulação de sangue total e células monomorfonucleares a fresco e após congelamento com os antígenos dosarampo e do tétano. A avaliação da resposta imune humoral foi realizada através de ELlSA. Dez indivíduos de cada grupo receberam uma dose adicional da vacina do sarampo ou tétano e tiveram sua resposta imune celular e humoral avaliadas pré- e pós-vacina. Resultados: Na avaliação da resposta celular aos antígenos do sarampo e do tétano, o método utilizando sangue total foi capaz de detectar uma maior porcentagem de células TCD4+ e TCD8+produzindo IFNy que o método utilizando células monomorfonucleares a fresco e após congelamento. Entre os grupos SV e SD não foi observada diferença na porcentagem de IFNy produzido pelas células TCD4+ e TCD8+ (CD4- SV: 1,15% versus SD: 1,38%, teste t, p=0,84) (CD8- SV: 2,40% versus SD: 1,95%, teste t, p=0,39). Todos os indivíduos apresentaram níveis protetores de anticorpos contra o sarampo, mas o grupo SD apresentou níveis mais elevados...(au).