Navegando por Palavras-chave "Ensaio cometa"

Agora exibindo 1 - 3 de 3
  • Nenhuma Miniatura disponível
    Item
    Somente Metadadados
    Efeito da carnitina sobre as espermatogônias tronco/progenitoras de ratos albinos tratados com etoposide na fase pré-pubere
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2013) Okada, Fatima Kazue [UNIFESP]; Miraglia, Sandra Maria [UNIFESP]
    Agentes quimioterapicos, embora eficazes no tratamento de diversos tipos de cancer, produzem efeitos colaterais indesejaveis. Um deles e a infertilidade. O etoposide, eficiente quimioterapico utilizado no tratamento de cancer em criancas e adolescentes, afeta tanto celulas cancerigenas como normais e causa severos danos a espermatogenese, principalmente quando administrado durante a fase pre-pubere. Em estudo anterior, observamos que a carnitina, um aminoacido presente normalmente em secrecoes epididimarias, reduz os danos testiculares causados pelo etoposide, quando administrada na pre-puberdade, previamente a este quimioterapico. O objetivo do presente estudo foi verificar se a administracao da carnitina (250 mg/Kg) a ratos pre-puberes (dos 25 aos 32 dias de idade), previamente ao etoposide (40mg/Kg, dose fracionada em 8 subdoses equitativas, administradas por 8 dias consecutivos), protege as espermatogonias tronco/progenitoras, reduzindo o dano a capacidade reprodutiva futura dos animais na idade adulta. Os animais foram sacrificados aos 32 (pre-pubere), 64 (pubere) e 127 (adulto) dias de idade e as espermatogonias indiferenciadas e em diferenciacao foram analisadas por imuno-marcacao e quantificadas empregando-se marcadores especificos (anti-DBA, anti-GFRα1, anti-UTF1, anti-SOX2, anti-PLZF e anti-RB1). O impacto final dos tratamentos com etoposide e carnitina foi avaliado atraves da analise dos seguintes parametros espermaticos: 1) concentracao de espermatides na etapa 19 (por orgao e por grama de orgao) e producao diaria de espermatozoides; 2) concentracao de espermatozoides nas porcoes cabeca+corpo e cauda do epididimo (por orgao e por grama de orgao); 3) transito espermatico nas porcoes cabeca+corpo e cauda do epididimo. A integridade do DNA dos espermatozoides foi tambem analisada, utilizando-se o oEnsaio Cometa Alcalinoo, que detecta quebras simples e duplas do DNA. O etoposide diminuiu significantemente o numero de espermatogonias SOX2-, PLZF- e RB1-positivas aos 32 dias. O mesmo foi observado aos 64 dias em relacao aos marcadores SOX2 e PLZF. Ja aos 127 dias foi observado um aumento significante em relacao ao numero de espermatogonias SOX2- e RB1-positivas. Os animais tratados com carnitina+etoposide apresentaram aumento significante do numero de espermatogonias RB1-positivas aos 32 dias de idade quando comparados aos animais tratados apenas com o etoposide. Aos 64 dias de idade, foi observado, nos ratos tratados previamente com carnitina, um aumento do numero de espermatogonias imunomarcadas para as proteinas SOX2 e PLZF. O mesmo foi notado aos 127 dias para a proteina PLZF. Por outro lado, nesta idade, os animais tratados com carnitina+etoposide apresentaram reducao significante do numero de espermatogonias SOX2- e RB1-positivas quando comparados aos animais tratados somente com etoposide, aproximando-se do numero de marcacoes observadas nos animais controles. Dentre os marcadores utilizados, o anticorpo anti-SOX2 foi aquele cujos resultados obtidos sugerem marcacao especifica de espermatogonias tipo tronco. Em relacao aos parametros espermaticos, foi observado, na fase adulta, um aumento significante da concentracao de espermatides na etapa 19 e de espermatozoides (porcoes cabeca+corpo e cauda do epididimo tanto por orgao quanto por grama de orgao) nos animais tratados com carnitina+etoposide quando comparados aos animais tratados apenas com etoposide. O mesmo foi observado em relacao a producao diaria de espermatozoide e ao transito espermatico. A analise da fragmentacao do DNA dos espermatozoides, atraves do ensaio Cometa, mostrou que os animais tratados com carnitina, previamente ao etoposide, apresentaram diminuicao do comprimento da cauda e do momento de extensao da cauda do Cometa quando comparados aos animais tratados apenas com o etoposide; estes dados mostram que a fragmentacao do DNA dos espermatozoides, nos animais tratados previamente com carnitina, foi menor quando comparada aquela de animais tratados so com o quimioterapico em questao. A analise geral dos resultados obtidos sugere que a carnitina promoveu protecao parcial das espermatogonias tronco/progenitoras contra os efeitos deleterios e genotoxicos do etoposide
  • Imagem de Miniatura
    Item
    Acesso aberto (Open Access)
    O flúor pode ser considerado um agente genotóxico in vivo? Uma revisão sistemática
    (Universidade Federal de São Paulo, 2023-09-22) Drummond, Giovana Wagner Branda [UNIFESP]; Ribeiro, Daniel Araki [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/9969803499258672; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    O objetivo deste estudo foi realizar uma revisão sistemática (RS) para investigar a literatura científica sobre os efeitos genotóxicos da exposição ao flúor (EF). As diretrizes do PRISMA-P foram utilizadas nesse cenário. A ferramenta PICOS (Participantes, Intervenção, Comparação, Desfecho e Desenho do estudo) adotou responder à seguinte questão: "O flúor pode ser considerado um agente químico genotóxico in vivo?" As bases de dados utilizadas para este estudo foi PubMed/Medline, SCOPUS e Web of Science. A qualidade dos estudos incluídos foi avaliada por meio do EPHP (Effective Public Health Practice Project). Um total de 20 estudos foram selecionados para avaliar a genotoxicidade induzida pelo flúor. 7 estudos demonstraram resultado positivo enquanto 13 estudos demonstraram resultados negativos. Após a revisão dos vinte estudos, 2 foram classificados como fracos, 4 foram considerados moderados e 14 foram considerados fortes, de acordo com a EPHPP. Dos 20 somente 16 estudos foram incluídos na metanálise devido a classificação como fraco e não descrição adequada de desvio padrão. A metanálise dos estudos de micronúcleos (MN) em fígado e medula óssea não mostrou diferença estatisticamente significativa (p=0,07). Nos estudos de troca de cromátides irmãs (ECS) em linfócitos também não diferiram estatisticamente significativamente (p=0,80). Para o ensaio de cometa (SCGEA), os estudos revelaram diferença estatisticamente significante com F em relação ao controle nos rins (SMD=2.09, 95% CI, 0.74 to 3.45, p<0.001), com Tau2=1,44; Chi2=566,38 e p=0,002, de modo que os estudos selecionados foram considerados heterogêneos e o I² de 87% indicou alta heterogeneidade. Em conjunto, foi estabelecido que a genotoxicidade do flúor é limitada e dose dependente.
  • Nenhuma Miniatura disponível
    Item
    Somente Metadadados
    Impacto da função dos espermatozóides antes e após o processamento seminal na taxa de gravidez em ciclos de fertilização in vitro
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2008) Restelli, Adriana Ester [UNIFESP]; Bertolla, Ricardo Pimenta [UNIFESP]
    Objetivo: Avaliar a qualidade funcional dos espermatozóides antes e após 0 processamento seminal por gradiente de densidade descontínuo e verificar se a taxa de fragmentação de DNA e a atividade mitocondrial dos espermatozóides, antes e após o processamento seminal por gradiente de densidade descontínuo, oferecern valor preditivo para gravidez em casais cuja esposa apresente até 37 anos de idade e em casais cuja esposa apresente mais de 37 anos de idade .. Métodos: Foi realizado urn estudo prospectivo com 128 casais submetidos a ciclos de Reprodução Assistida, subdivididos em 2 subgrupos: urn grupo de casais cujas esposas apresentavam ate 37 anos de idade e urn grupo cujas esposas apresentavam mais de 37 anos de idade. As amostras seminais foram obtidas e analisadas segundo os critérios da OMS (1999) e a morfologia de acordo com 0 critério estrito de Kruger (1986). Foi realizado 0 processamento seminal por gradiente de densidade descontínuo para os procedimentos de fertilização in vitro. Uma alíquota do sêmen fresco e outra de sêmen processado foram separadas para a realização dos testes para avaliação da integridade do DNA e da atividade mitocondrial. Quanto à fragmentação do DNA, as células foram classificadas como Cometa I (DNA integro) a Cometa IV (DNA altamente fragmentado). Na análise da atividade mitocondrial, as células foram classificadas como DAB I (todas as mitocondrias ativas) a DAB IV (todas as mitocondrias inativas). Os subgrupos foram divididos em casais que atingiram a gravidez ou casais que não atingiram a gravidez, e a comparação foi realizada através de urn teste T de Student para amostras não pareadas. 0 efeito do processamento foi avaliado através de urn teste T de Student para amostras pareadas. Variáveis categóricas foram comparadas através de urn teste de Qui-quadrado de Pearson ou urn teste exato de Fisher, conforme apropriado. Para verificar 0 impacto da qualidade funcional dos espermatozóides nas taxas de gravidez em mulheres com idade acima de 37 anos, abaixo de 37 anos foi realizada uma regressão logística. Foi adotado um alfa de 5%. Resultados: A taxa de gravidez no grupo de mulheres com até 37 anos foi de 41,8% e no grupo de mulheres acima dos 37 anos foi de 21,6% (p=0,031). Quando considerados todos os casais, apenas a idade do homem foi menor no grupo que atingiu a gravidez (p=0,049). Quando estratificados pela idade da mulher, nenhuma diferença foi observada. 0 processamento seminal levou a taxas maiores de atividade mitocondrial e integridade de DNA em todos os grupos. Na análise de regressão logística, os modelos para mulheres com mais de 37 anos foram melhores em prever a chance de gravidez. Conclusões: Os resultados permitem concluir que, nas condições deste estudo, 0 processamento seminal por gradiente de densidade descontínuo leva a uma amostra com maior integridade de DNA e atividade mitocondrial e a qualidade funcional dos espermatozóides disponíveis para 0 procedimento (pós-processamento seminal) apresenta uma forte influência sobre os resultados de ciclos de fertilização in vitro em mulheres com mais de 37 anos de idade..