Navegando por Palavras-chave "Epitélio corneano"

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    Avaliação das aberrações de alta ordem em córneas regulares e do remodelamento epitelial em pacientes de pacientes submetidos a femtolasik topoguiado (contoura) em um olho e customizado pela asfericidade (custom-q) em olhos contra-laterais: estudo prospectivo, randomizado e duplo-cego
    (Universidade Federal de São Paulo, 2024-06-14) Lyra, Adriana Falcão [UNIFESP]; Nose, Walton [UNIFESP]; Fontes, Bruno Machado [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/4402073870459508; http://lattes.cnpq.br/0107737030151731; http://lattes.cnpq.br/0452970023315797
    Objetivo: Avaliar os resultados refrativos, as aberrações corneais de alta ordem (HOA’s RMS), o mapeamento epitelial (SD-OCT Avanti®) e o consumo tecidual no pré e pós-operatório de córneas regulares submetidas a cirurgia refrativa com a técnica FEMTOLASIK. Em um olho foi realizada a técnica customizada pela asfericidade (Custom-Q®, WaveLight®; Alcon®) e Topoguiada (Contoura®, WaveLight®; Alcon®) no olho contralateral, em pacientes míopes com ou sem astigmatismo. Métodos: Realizado um estudo prospectivo, randomizado e duplo-cego, que avaliou 96 olhos de 48 pacientes. Foram incluídos pacientes de ambos os sexos, entre 20 e 35 anos, com equivalente esférico estável e máximo de -8.00 DE. Todos os pacientes realizaram exame oftalmológico completo durante o acompanhamento pré e pós- operatório, sendo mapeamento epitelial e tomografia de córnea realizada no pré e pós-operatório de 3 meses. Resultados: A acuidade visual sem correção de 20/20 foi obtida em 97% em ambas as técnicas. A acuidade visual sem correção de 20/16 foi obtida em 64% dos olhos submetidos ao Custom-Q® e em 56% dos olhos submetidos ao Contoura®. Ambas as técnicas apresentaram ganhos na acuidade visual corrigida e foram efetivas na correção do astigmatismo refracional. Avaliamos 17 setores do mapa epitelial e não encontramos diferença estatística entre os grupos no pré e pós- operatório (P>.05). HOA’s RMS, Coma Z3±1, Trefoil Z3-3 e o consumo tecidual exibiram diferenças estatísticas entre as técnicas (P<.05). Conclusão: Não houve diferença estatística entre as técnicas nos resultados refrativos e no remodelamento epitelial, nos 17 quadrantes avaliados. Na técnica Contoura® foi encontrado um menor valor pós-operatório de HOA’s RMS, Coma Z3±1 e Trefoil Z33 (P<.05), mas sem diferença estatística na correção da aberração esférica e no componente do astigmatismo corneal no mapa de Wavefront de Zernike (P>.05). O grupo Contoura® apresentou um maior consumo tecidual em relação ao Custom Q® (P<.05).
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    Caracterização dos mediadores inflamatórios no epitélio conjuntival, no epitélio corneano e no filme lacrimal de pacientes portadores de ceratocone em progressão
    (Universidade Federal de São Paulo, 2024-08-14) Silva, Albert Wilson Santos Machado [UNIFESP]; Oliveira, Lauro Augusto [UNIFESP]; Sousa, Luciene Barbosa [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/2367491641205774; http://lattes.cnpq.br/5591822363508144; http://lattes.cnpq.br/3604948470774285
    Objetivo: Este estudo teve como objetivo caracterizar mediadores inflamatórios no filme lacrimal de pacientes portadores de ceratocone (KC), investigar a expressão gênica desses mediadores em células epiteliais da córnea e sua imunodetecção em células epiteliais conjuntivais, em comparação com indivíduos sem ceratocone. Métodos: Este estudo transversal envolveu 31 pacientes com KC e 23 indivíduos sem ceratocone. A coleta de lágrima foi obtida por instilação na superfície ocular de 60μl de soro fisiológico estéril (método wash). Os níveis de IL-5, IL-13, IL-2, IL-6, IL-10, IFN-gama, TNF-alfa e IL-4 foram detectados com o kit inflamatório LEGENDplex HU Th1/Th2 e analisados por citometria de fluxo. O epitélio da córnea foi obtido por ceratectomia manual de pacientes com KC candidatos ao crosslinking corneano e de indivíduos sem ceratocone candidatos à ceratectomia fotorrefrativa constituindo o grupo controle. As amostras foram imediatamente armazenadas a -80°C, até posterior extração de mRNA e análise por RT-PCR, para medir a expressão gênica de IL-5 e IL-6. Amostras de epitélio conjuntival foram obtidas por citologia de impressão e analisadas por imuno-histoquímica/microscopia confocal, em busca de imunodetecção de IL-5 e IL-6. Resultados: As concentrações das citocinas IL-13, IL-6, IL-10, INF-γ, TNF-α, IL-4 no filme lacrimal foram maiores nos pacientes com KC do que nos controles, embora sem significância estatística. A expressão gênica de IL-5 e IL-6 no epitélio corneano foi maior em pacientes com KC, quando comparada ao grupo controle (IL-5 foi 50% e IL-6 foi 20% maior, respectivamente). As análises imuno-histoquímicas mostraram maior imunodetecção de IL-5 e IL-6 no epitélio conjuntival de pacientes com KC, em comparação ao grupo controle. Conclusões: Este estudo demonstra que algumas citocinas com maior concentração no filme lacrimal tiveram maior expressão gênica no epitélio corneano e foram detectadas com maior intensidade no epitélio conjuntival de pacientes com KC.
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    Diabetes mellitus: alterações metabólicas e mitocondriais em células epiteliais corneanas
    (Universidade Federal de São Paulo, 2022-03-23) Mussi, Natalia [UNIFESP]; Campos, Mauro Silveira de Queiroz [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/8668472375424523; http://lattes.cnpq.br/7858613725199409
    Purpose: Diabetic Keratopathy affects approximately 70% of diabetic patients. Mitochondrial dysfunction is considered a central feature underlying diabetic complications. The purpose of this study was characterized mitochondrial alterations in telomerase-immortalized human corneal epithelial (hTCEpi) cells exposed to hyperglycemic and hyperosmotic stress, also the changes in primary cultured diabetic human corneal epithelial cells (HCECs). Methods: To determine the effects of diabetes on mitochondria and metabolism, donor human corneas from diabetics were obtained from Tissue Transplant Services at UT Southwestern Medical Center. Primary cultures were generated using an established lab protocol. HCECs and hTCEpi cells were cultured in a defined serum-free keratinocyte growth media containing 6 mM of glucose. Cells were cultured for 24h, 3, 5, 7, 9 or 14 days in media with additional 19mM of glucose. Cells supplemented with 19 mM mannitol were used as an osmotic control. Mitochondrial morphology and polarization were assessed using MitoTracker Green, TMRE, and JC-1. Metabolic changes were quantified in real time using a Seahorse metabolic flux analyzer. Cell cycle were determined by staining with Propidium Iodide and analyzed using the Celigo imaging cytometer. Cell migration was evaluated by the wound healing assay and the cells proliferation was characterized by daily cell count for 7 or 14 days. Results: The HCECs cells from diabetic patients showed alterations in mitochondrial polarization and severe fragmentation. The hTCEpi cells exposed to acute hyperglycemia showed no abnormalities in cell cycle control and metabolism. Chronic exposure of hTCEpi cells to hyperglycemia (14 days) triggered cell cycle arrest in G0/G1 phase. At 14 days there was also a decrease in cell migration in the groups exposed to hyperglycemic and hyperosmotic stress. However, cell proliferation remained unchanged after both 7 and 14 days. Using JC-1, cells cultured in high glucose for 14 days showed a loss of polarization and mitochondrial fragmentation but this wasn’t significant in comparison to hyperosmolar stress. Metabolic activity was unchanged in cells cultured in high glucose for 24 hours. By day 3, cells showed a measurable drop in spare respiratory capacity that remained decreased through day 14. By day 5, glycolysis (ECAR) began to decrease and remained low through day 9. At days 7 and 9, OCR was increased, shifting cells towards a more respiratory phenotype. By day 14 OCR decreased and ECAR increased to normoglycemic levels and the phenotype became glycolytic again. There was also a sharp drop in others mitochondrial metabolic parameters. Discussion: Chronic, not acute, exposure to high glucose negatively impacts mitochondrial structure and function. The decline in mitochondrial activity was associated with a recovery of glycolysis, indicative of metabolic adaptation.
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    Effect of corneal epithelium on ultraviolet-A and riboflavin absorption
    (Conselho Brasileiro de Oftalmologia, 2011-10-01) Bottós, Katia Mantovani [UNIFESP]; Schor, Paulo [UNIFESP]; Dreyfuss, Juliana Luporini [UNIFESP]; Nader, Helena Bonciani [UNIFESP]; Chamon, Wallace [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    PURPOSE: To determine if the corneal epithelium prevents the collagen cross-linking effect. Using immunofluorescence microscopy after CXL, we indirectly analyzed the role of the epithelium as ultraviolet-A (UVA) shield as well as a barrier to riboflavin penetration. METHODS: Fifteen freshly enucleated porcine eyes were divided into 3 groups. The corneal epithelium was kept intact in all groups. Five eyes served as control (Group 1). On group 2, eyes received tetracaine anesthetic drops and topical 0.1% riboflavin solution (10 mg riboflavin-5-phosphate in 10 mL 20% dextran-T-500). On Group 3, riboflavin was injected into the anterior chamber to allow penetration of the drug through the endothelium. Groups 2 and 3 were exposed to UVA (365 nm, 3 mW/cm²) for 30 minutes. Ultra-thin sections (8 µm) of the corneas were stained with anti-collagen type I and DAPI (4,6-diamidino-2-fenilindole dihydrocloride) and analyzed with fluorescence microscopy. RESULTS: Corneas treated with UVA irradiation and intracameral injection of riboflavin (Group 3) showed greater pattern of collagen organization compared to groups 1 (Control) and 2 (riboflavin and tetracaine eye drops). A yellow stromal staining, which represents the riboflavin diffusion into the stroma, was only observed in eyes injected with riboflavin into the anterior chamber. CONCLUSION: Using immunofluorescence microscopy in porcine corneas, we demonstrated that the corneal epithelium reduces the effectiveness of CXL by preventing the penetration of the drug and not by limiting the UVA transmittance. An inadequate intrastromal concentration of riboflavin may impair CXL effect.