Navegando por Palavras-chave "HEK293"

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    Peptidomic Analysis of Human Cell Lines
    (Amer Chemical Soc, 2011-04-01) Gelman, Julia S.; Sironi, Juan; Castro, Leandro M. [UNIFESP]; Ferro, Emer S.; Fricker, Lloyd D.; Albert Einstein Coll Med; Universidade de São Paulo (USP); Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Peptides have been proposed to function in intracellular signaling within the cytosol. Although cytosolic peptides are considered to be highly unstable, a large number of peptides have been detected in mouse brain and other biological samples. in the present study, we evaluated the peptidome of three diverse cell lines: SH-SY5Y, MCF7, and HEIC293 cells. A comparison of the peptidomes revealed considerable overlap in the identity of the peptides found in each cell line. the majority of the observed peptides are not derived from the most abundant or least stable proteins in the cell, and approximately half of the cellular peptides correspond to the N- or C- termini of the precursor proteins. Cleavage site analysis revealed a preference for hydrophobic residues in the PI position. Quantitative peptidomic analysis indicated that the levels of most cellular peptides are not altered in response to elevated intracellular calcium, suggesting that calpain is not responsible for their production. the similarity of the peptidomes of the three cell lines and the lack of correlation with the predicted cellular degradome implies the selective formation or retention of these peptides, consistent with the hypothesis that they are functional in the cells.
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    Acesso aberto (Open Access)
    O pesticida aldrin induz cardiotoxicidade aguda: envolvimento do canal para sódio nav1.5
    (Universidade Federal de São Paulo, 2023-09-04) Beserra, Samuel dos Santos [UNIFESP]; Campos, Danilo Roman [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/8233000987750211; http://lattes.cnpq.br/1928135430183833
    Introdução: A presença do inseticida Aldrin, ou de seus resíduos, acumulados nos lençóis freáticos e em rios onde se extraem a água para consumo doméstico, ou irrigação de cultivos agrícolas, é um grave problema de saúde pública. A bioacumulação deste agrotóxico tem como sintomas: cefaléia, vômitos, tremor muscular, convulsões, as quais são descritos em casos relacionados ao manejo inadequado do agrotóxico ou de elevada ingestão do pesticida. Porém, poucos estudos descrevem sua ação na atividade elétrica cardíaca. Objetivo: Investigar o potencial arrítmico do Aldrin e o papel do canal NaV1.5 Métodos: O ECG, ex vivo, dos corações de camundongo C57Bl/6 foram feitos. Cardiomiócitos isolados do ventrículo esquerdo de camundongos C57Bl/6, e canais NaV1.5 humano foram transitoriamente expressos em células embrionárias de rim humano, linhagem 293 (HEK293), usando um sistema de expressão heteróloga. Cardiomiócitos derivados de células-tronco pluripotentes induzidas de humanos (hiPSC-CMs) foram utilizados para estudar o efeito do aldrin sobre o potencial de ação (PA) cardíaco. As medidas eletrofisiológicas foram realizadas por meio da configuração célula inteira da técnica de Patch-Clamp, na modalidade voltage-clamp para mensuração da corrente de sódio (INa) e current-clamp para registros de PA. Resultados: O aldrin modificou o perfil das ondas do ECG e aumentou a frequência cardíaca nos experimentos in vitro. Além disso, o inseticida promoveu redução da derivada máxima da despolarização (+dV/dt) que corresponde a velocidade máxima da fase 0 do PA, em cardiomiócitos isolados derivados do ventrículo esquerdo de camundongo. Posteriormente foi avaliado o efeito do pesticida sobre o NaV1.5 expresso em célula HEK293, onde há a redução da amplitude de pico da INa, que apresentou dependência da frequência para o efeito. O aldrin promoveu redução significativa da derivada máxima da despolarização (+dV/dt), e também a duração do PA de cardiomiócitos derivados de célula tronco pluripontente induzidas de humanos. Conclusões: Os resultados demostram que o aldrin é capaz de alterar a atividade de condução elétrica do coração, ao modular a corrente de canais NaV1.5 e modificar suas propriedades do PA, o que torna este pesticida um agente arritmogênico e de grande risco à saúde pública.