Navegando por Palavras-chave "Levedura"
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- ItemSomente MetadadadosAvaliação das espécies de malassezia em indivíduos com pitiriíse versicolor e clinicamente sadios(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2013-08-28) Bezerra, Fabiane Castilho; Barbosa, Dulce Aparecida [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Introdução: O gênero Malassezia compreende leveduras lipodependentes, exceto a M. pachydermatis. Várias espécies do gênero fazem parte da biota da pele e sob certas condições produzem diferentes infecções cutâneas. A pitiríase versicolor é doença de distribuição universal, prevalente em climas tropicais e subtropicais. Clinicamente representada por máculas ou placas de coloração variável (eritematosa, hipocrômica ou hipercrômicas), descamativas e assintomáticas, embora alguns pacientes relatem prurido. Localiza-se principalmente no tronco superior e membros superiores, podendo afetar outras áreas. O diagnóstico clínico é confirmado por exame laboratorial. Objetivos: Isolar e identificar Malassezia spp. de pacientes com pitiríase versicolor e de indivíduos sem lesões clínicas aparentes; empregar métodos fenotípicos na caracterização das espécies; avaliar as espécies conforme as variantes clínicas e distribuição das lesões quanto às regiões do corpo; verificar a viabilidade de dois métodos diferentes na preservação do cultivo. População e métodos: Trata-se de estudo transversal realizado no ambulatório da Universidade Federal de São Paulo, no período de setembro de 2011 a agosto de 2012 em indivíduos de ambos os sexos, de 18 a 40 anos com ou sem lesão clínica aparente,de pitiríase versicolor (PV). Foram excluídos indivíduos com história de tratamento antifúngico tópico ou sistêmico há menos de dois meses, em uso de imunossupressores ou com distúrbios da sudorese e xerose cutânea. Foi pesquisada a presença de Malassezia spp; escamas de lesão sugestiva de PV foram coletadas com lâmina de vidroe foi realizado esfregaço na região anterior do tórax com feltro esterilizado. Foi feito exame microscópico direto das escamas, cultura em meio ágar Sabouraund dextrose com cloranfenicol, Dixon modificado e provas da catalase, esculina, Tween e Cremophor EL. Resultados: Das amostras coletadas (n=xxx) 31% eram provenientes de pacientes com diagnóstico clínico de PV e 68% de indivíduos sadios. Nos pacientes com PV, 10% referiam quadro prévio da doença, 13% caso semelhante em familiares ou coabitantes e 30% prática de esporte. Nos sadios 2, 3 e 33% respectivamente. Grau moderado de acometimento clínico foi evidenciado na maior parte dos pacientes. Nos dois grupos estudados M. furfur foi a espécie mais isolada, seguida por M. globosa e M. pachydermatis respectivamente nos pacientes com PV e sadios. Conclusão: Não houve diferença entre espécies isoladas de pacientes com PV e de pacientes clinicamente sadios, bem como correlação entre a espécie isolada e grau de acometimento clínico. História prévia da doença e antecedentes familiares de PV foram fatores significativos no desenvolvimento da doença. Outras condições inerentes ao hospedeiro podem ser determinantes na manifestação clínica de pitiríase versicolor.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Caracterização ultraestrutural da parede de microrganismos sob ação do CPP AIP6(Universidade Federal de São Paulo, 2023-09-12) Souza, Louise Eloá Araújo [UNIFESP]; Silva, Emerson Rodrigo da [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/7800589206457326; http://lattes.cnpq.br/6243002423243007Introdução: O penta peptídeo RLRWR (AIP6) pertence ao grupo dos peptídeos de penetração celular (CPPs) mais curtos já reportados na literatura. A presença de argininas em sua composição confere grande cationicidade a esta sequência, tornando-a também candidata a apresentar propriedades antimicrobianas. Embora a interação de CPPs com células de mamífero seja amplamente investigada, estudos sobre os efeitos dessas moléculas sobre a parede celular de microrganismos não são realizados com a mesma intensidade. Nesta dissertação, investigamos a interação do peptídeo AIP6 com a parede celular de microrganismos-modelo utilizando técnicas de microscopia de força atômica (AFM) capazes de fornecer detalhes físico-químicos com resolução ultra alta. Desenvolvemos protocolos de análise que nos permitiram obter detalhes tridimensionais dessas interfaces, tanto em amostras fixadas quanto em células vivas mantidas em meio líquido. Também realizamos a caracterização da assinatura espectroscópica da parede em escala nanoscópica. Até onde temos conhecimento, trata-se da primeira vez que a ação de CPPs é avaliada por meio da combinação dessas técnicas de microscopia. Objetivo: obtenção de detalhes tridimensionais, em escala nanométrica, de paredes de procariotos e eucariotos submetidos à ação de um CPP. Além disso, também investigamos a assinatura espectroscópica dessas superfícies por meio da combinação de AFM com espectroscopia de infravermelho. Por fim, também pretendemos fornecer informações sobre o comportamento físico-químico do peptídeo e de sua capacidade de nanoestruturação. Materiais e métodos: O comportamento de nanoestruturação do peptídeo foi avaliado por fluorimetria, enquanto sua estrutura secundária foi avaliada por dicroísmo circular. Os modelos celulares procariotos foram as bactérias E. coli e B. subtilis, enquanto o modelo eucarioto foi a levedura S. cerevisiae. As células foram cultivadas em meios nutrientes padrão, sendo a concentração inibitória mínima (MIC) do AIP6 determinada pelo método de diluição seriada com análise de densidade ótica ao longo do tempo. Experimentos de AFM convencional e de nanoespectroscopia (AFM-IR) foram realizados em lâminas fixadas contendo células previamente incubadas com o peptídeo. Análises em células vivas foram realizadas em BioAFM.. Resultados e discussão: Foram encontradas MICs de 0.07 e 0.6 mg/mL, respectivamente, para bactérias Gram-positivas da espécie B. subtilis e Gram-negativas do tipo E. coli. As análises ultraestruturais da parede permitiram a observação de deformações, bem como a formação de domínios peptídicos foi identificada através da assinatura espectroscópica. No caso de células de levedura, não foram observadas grandes deformações, no entanto, verificamos em espectroscopia de infravermelho a aparição de várias vibrações que sugerem que o peptídeo estimula a produção de beta-glucanos em S. cerevisae. Conclusão: O peptídeo AIP6 mostrou afinidade pelas paredes celulares de bactérias, especialmente B. subtilis, enquanto não foi verificada ação antimicrobiana contra S. cerevisae. Nos procariotos, foi observada a formação de domínios peptídicos que provavelmente induzem a formação de poros. No caso de eucariotos, também foi verificada a formação de alguns domínios peptídicos, porém, em grau muito menor. Nesse caso, encontramos dados que sugerem que o AIP6 estimula a produção de beta-glucanos que recobrem a parede celular e facilitam a agregação entre células de levedura.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Degradação de resíduo de levedura empregado em biossorção por processos eletro-oxidativos avançados(Universidade Federal de São Paulo, 2017-10-06) Bargas, Maria Francisca Ribeiro de Aguiar [UNIFESP]; Rodrigues, Christiane de Arruda [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)The use of agroindustrial waste as adsorbents has been evaluated as an alternative treatment of textile effluents, mainly for color removal. However, solutions are required for the proper fate of the adsorbent after sorption of the organic compound. In this way, the Advanced Oxidative Processes (POA) appear as an alternative of clean destination of the solid residues containing organic compound. The objective of this work was to evaluate the efficiency in the treatment of the degradation of dry yeast biomass, biosorbent from the residue of the sugar and alcohol industry, after the sorption of methylene blue reactive dye by means of photo-Fenton and heterogeneous photocatalysis (photocatalysis and photoelectrocatalysis) using a TiO2 nanotubular oxide layer as catalyst. The study was carried out with three yeast biomasses, washed yeast biomass (WYB), in nature Yeast Biomass (YB) and yeast biomass after the sorption of the methylene blue reactive dye (SYB). Initially the BL was washed with distilled water to remove the soluble residue in order to quantify the reduction of mass and mineralization only of the solid fraction. The optimization studies of the best conditions of degradation and mineralization of the organic matter were obtained with the WYB. The optimization studies of the best conditions of degradation and mineralization of the organic matter were obtained with the WYB. In the photo-Fenton process, the optimized condition was 2,500 mg L-1 of H2O2 and 40 mg L-1 of Fe2+ and 100 mg of biomass mass, with sequential addition of H2O2 during the degradation process, at 15 min intervals, during 2 hours of treatment, with a percentage of mineralization around 45% and destruction of the degraded biomass (lysed). While in heterogeneous photocatalysis, although there is no evidence of cell lysis, the photocatalytic treatment showed to be more efficient in reducing the organic load of the WYB and YB compared to the treatment by photoelectrocatalysis, with a mass reduction percentage of around 46,5% after 4 hours of treatment. In both studies, an irradiation source with a mercury vapor lamp of 80 W was used. Then, the combination of the optimized processes, photo-Fenton followed by photocatalysis, was employed in the treatment of YB and SYB. After the degradation, YB presented a reduction of mass and mineralization around 85% and SYB around 60% of mass reduction and 50% of mineralization. The combination of the photo-Fenton process followed by the heterogeneous photocatalysis showed to be a clean destination of solid residues formed by yeast biomass with adsorbed dye.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Identificação e caracterização de leveduras produtoras de micosporinas: uma abordagem biotecnológica para novos bloqueadores de radiação UV-A e UV-B(Universidade Federal de São Paulo, 2023-06-27) Silva, Gabriel Martins da [UNIFESP]; Pascon, Renata Castiglioni [UNIFESP]; Medeiros, Lívia Soman de [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/7404733691134037; http://lattes.cnpq.br/4203540318082044; http://lattes.cnpq.br/6738128314527827A radiação ultravioleta causa diversos efeitos nocivos aos organismos vivos, em especial na epiderme humana, onde as lesões podem culminar em câncer de pele. As alternativas existentes para evitar ou retardar esses impactos na pele, são os protetores solares sintéticos artificiais, os quais são tóxicos, pois têm potencial carcinogênico e neurotóxico em humanos. Além disso, são citotóxicos e acumulam em organismos de ecossistemas aquáticos. Biomoléculas produzidas por algas, cianobactérias e fungos, conhecidas como micosporinas e aminoácidos tipo micosporinas, são capazes de converter radiação ultravioleta em calor, logo, podem compor um protetor solar alternativo com baixa ou nenhuma toxicidade. O Laboratório de Interações Microbianas da Universidade Federal de São Paulo, tem se dedicado a colecionar leveduras que possuam a capacidade de realizar a biossíntese de micosporinas. Atualmente foram reunidos 4 isolados produtores de micosporinas Com isso, o objetivo deste trabalho foi caracterizar fenotipicamente estes isolados, e testar a capacidade de produzir micosporinas. Foram empregadas técnicas de microscopia ótica, diluição seriada, PCR, sequenciamento de Sanger e Ultra High Performance Liquid Chromatography – High Resolution Mass Spectrometry. Foi possível fazer uma análise fenotípica da micromorfologia, testar as melhores temperaturas de crescimento, confirmar a identificação dos isolados pelo sequenciamento dos genes que codificam as subunidades maior e menor do ribossomo e região do espaçador interno transcrito. Também confirmamos o baixo potencial patogênico dos isolados, resistência deles ao estresse osmótico e houve a confirmação da produção de micosporinas em todos dos isolados investigados. Portanto, os isolados testados no trabalho apresentam potencial biotecnológico para a produção de um protetor solar sintético natural seguro para os humanos e para o meio ambiente.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Impacto da deleção de GPP2 sobre o processo de autofagia em Cryptococcus neoformans(Universidade Federal de São Paulo, 2021-09-30) Padilla, Adrian Alvarez Padilla [UNIFESP]; Vallim, Marcelo Afonso [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/4039129182586680; http://lattes.cnpq.br/5182785443286188A criptococose é uma micose de caráter sistêmico de grande importância clínica. A doença é causada, sobretudo, pelas espécies dos complexos Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii, esses fungos patogênicos, onipresentes e oportunistas causam infecção pulmonar, cutânea, renal, esplenomegalia e, mais importante dada a letariedade, a meningoencefalite. A criptococcose acomete, principalmente, pacientes com sistema imunológico debilitado. Durante a infecção, a levedura precisa se adaptar às condições desfavoráveis no hospedeiro como a alta temperatura (37° C) e a disponibilidade de nutrientes. O tratamento dessa micose compreende o uso prolongado de antifúngicos que, em sua maioria, são tóxicos para o paciente e o uso constante desses medicamentos induz o surgimento de cepas resistentes. Dessa forma, novas terapias antifúngicas são necessárias para aumentar as opções de tratamento. A autofagia atua como um sistema de degradação e reciclagem intracelular de macromoléculas e organelas que garante a homeostasia e a sobrevivência da célula diante de diferentes fatores de estresse. Análises de transcriptoma RNAseq em meio rico (YPD) em C. neoformans mostram que a deleção do gene GPP2 reprime e induz alguns genes chaves da autofagia tais como: ATG1, ATG2, ATG4, VPS15, ATG15, VPS30 e PEP4. Os nossos dados de qPCR validaram os resultados das análises de RNAseq. Trabalhos anteriores do nosso grupo mostraram que no mutante gpp2Δ ocorre a interrupção de várias vias biossintéticas e captação de aminoácidos que resulta na queda da viabilidade celular, incapacidade de lidar com vários tipos de estresses, redução da expressão de fatores de virulência, (melanina, fosfolipase e urease) e atenuação de virulência em Galleria mellonella, indicando que a biossíntese e absorção de aminoácidos sulfurosos é uma característica importante para a sobrevivência do patógeno in vivo e in vitro. Em Saccharomyces cerevisiae, o Gpp2 é induzido em resposta ao estresse hiperosmótico e oxidativo. Neste trabalho mostramos que em C. neoformans, Gpp2 é necessário para responder, principalmente, ao estresse osmótico, e que a via da autofagia encontra-se reprimida na presença do aminoácido metionina tanto na linhagem selvagem como no mutante gpp2Δ. Nossos dados em conjunto com os trabalhos anteriores, reportados pelo nosso grupo de pesquisa, sugerem que Gpp2 é um fator importante para a adaptação geral do patógeno a vários estresses e talvez possa ser um alvo interessante para uso terapêutico.