Navegando por Palavras-chave "Membrana celular"
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- ItemAcesso aberto (Open Access)Análise morfo-funcional dos modos de ação de peptídeos mastoparanos em células de glioblastoma multiforme(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-08-31) Silva, Annielle Mendes Brito da [UNIFESP]; Miranda Filho, Manoel de Arcisio [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/2680038286691388; http://lattes.cnpq.br/1164391713485616; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Glioblastoma multiforme é o mais frequente e letal dos tumores malignos que atingem o cérebro. Por causa da sua complexidade e heterogeneidade, este tumor se tornou resistente às terapias convencionais, além dos múltiplos efeitos adversos. Desta forma, a ciência vem procurando novas alternativas eficazes e menos danosas para o tratamento do glioblastoma multiforme. Mastoparanos são peptídeos de origem animal que possuem diversas atividades biológicas, dentre elas, vem destacando-se o potencial citotóxico contra vários tipos de células cancerosas. Neste estudo, foram realizados estudos morfofuncionais para avaliar como quatro peptídeos mastoparanos - Anoplin, Polybia-MP1, Mastoparan X e HR1 -, com diferentes características físico-químicas, exercem atividade citotóxica sobre as células de linhagem T98G, de glioblastoma multiforme humano. Os resultados indicaram que três destes peptídeos induziram significativa redução da viabilidade celular, promovendo alterações em parâmetros morfológicos, como redução da área celular e da área nuclear. Os ensaios para avaliação do tipo de morte celular apresentaram um grande número de células com significativa marcação de iodeto de propídio, também evidenciada em ensaios de microscopia de fluorescência, mostrando que os mastoparanos possuem atividade membranolítica e pró-necrótica. Com o uso de sondas fluorescentes específicas, foi possível analisar que os mastoparanos são capazes de se inserir membrana das células de GBM humano, modulando a sua fluidez em diferentes posições. Em complemento, os resultados de experimentos com sistemas miméticos de membrana evidenciaram que o aumento do conteúdo aniônico presente na face externa das membranas contribui proporcionalmente para o aumento da atividade dos peptídeos mastoparanos. Também foi verificado que, além das cargas de superfície, o efeito do campo elétrico criado pela distribuição diferencial de íons entre os meios intra- e extracelular é capaz de alterar a atividade do peptídeo MPX.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Efeito antitumoral do ácido graxo docosahexaenóico em células de glioblastoma humano(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-02-24) Queiroz, Fernanda de Oliveira [UNIFESP]; Miranda Filho, Manoel de Arcisio [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/2680038286691388; http://lattes.cnpq.br/4963386651580275; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Glioblastoma Multiforme is considered one of the most serious and common brain neoplasias, representing 50% of ali malignant tumors present in the brain. With a poor prognosis, half of the patients die within 1 year of diagnosis. Gliomas present great changes in their morphology, so they are considered tumors of high complexity. These morphological changes are one of the causes for resistance to existing therapies. In order to look for new alternatives for the treatment of these neoplasias, several compounds have been studied, among them, the fatty acids. Fatty acids are organic components, poorly soluble in water and play important roles in cell membranes and metabolic processes. They are divided into saturated and unsaturated. In order to understand the action of saturated fatty acids, palmitic acid and polyunsaturated fatty acids, docosahexaenoic acid (DHA) and arachidonic acid (AA) in head cancer, in this study we used glycoproteinoma multiforme cells from the T98G lineage. Different assays were performed to elucidate the mechanism of operation. Initially, cell viability tests were performed by MTT to observe whether these compounds cause death or the reduction of cell viability. In sequence, membrane fluidity tests were performed to understand the selectivity of DHA, since only this acid had a reduction in the viability of human glioblastoma cells. To understand and quantify the type of death, whether apoptotic or necrotic, flow cytometry and Co-incubation Hoechst 33342 / PI were performed at different concentrations and observed a higher AnexinN labeling in these cells. Nuclear morphological changes in T98G cells were observed from Hoechst .33342 cells. Data obtained showed fragmented, picnotic and condensed nuclei, which are characteristics of cellular apoptosis. Levels of reactive oxygen species were also performed. With the use of the DHE probe, we observed an increase in the production of reactive oxygen species (ROS), which indicates that the type of death we are observing is apoptosis. The viability of DHA is probably due to the induction of the production of high levels of ROS.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Estudo da interação do metronidazol em modelos de membrana(Universidade Federal de São Paulo, 2018-05-24) Rodrigues, Jefferson Carnevalle [UNIFESP]; Caseli, Luciano [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Interactions of bactericidal and antiprotozoal drugs with cell membranes could be better understood at the molecular level if nanostructured systems are employed. This study aimed to study the action of the drug Metronidazole in Langmuir films of phospholipids, which are used as simple models of cell membranes. The phospholipids used were dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC), dipalmitoylfosfatil serine (DPPS) and dipalmitoylfosfatil glycerol (DPPG), cholesterol (COL), 1,2 Dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocoline (DOPC), and combinations of glycoproteins with dipalmitoylphosphatidylcholine (GLICOP +DPPC), peptidoglycan with DPPG (Pep+DPPG) and lipopolysaccharides with DPPG (LPS+DPPG). The lipids were spread on the air-water interface, and the drug injected into the aqueous subphase. The adsorption of the drug was evaluated by surface pressure measurements, infrared spectroscopy and Brewster angle microscopy (BAM). The drug causes pronounced effects on pressure-area isotherms for DPPC, DPPS, DPPG, Cholesterol, Glycoproteins + DPPC, Lipopolysaccharides + DPPG and Peptidoglycans+DPPG condensing the monolayer (shifts the isotherms to smaller areas per molecules at a given pressure), but expanding DPPG and DPPE monolayers. Infrared spectroscopy shows significant changes in the bands related to the stretch of methyl, increasing the molecular order for DPPS, DOPC, DPPE monolayers, and mixtures of DPPC with glycoproteins, whereas for DPPG, DPPG + LPS and DPPG + Pep the molecular order has a decrease, can also be observed probable interactions in the hydrophilic regions of the film when in the presence of mixed monolayers (LPS + DPPG and Pep + DPPG). BAM images show that the surface morphology of the lipid monolayers also changed with the presence of the drug, causing molecular aggregation, but with different morphological configurations for each film. This shows that the interaction of Metronidazole in the monolayer is modulated by the lipid composition at the air-water interface, as well as the drug-lipid interactions. We hope these results have a relevant impact on the understanding of how bioactive compounds act in microbial cells and in the pursuit for proposals of mechanisms at the molecular level.
- ItemSomente MetadadadosEstudo de membrana biológica em ratos na prevenção de fibrose pós laminectomia(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2003) Herculano, Marco Antonio [UNIFESP]; Tella Júnior, Oswaldo Inácio de [UNIFESP]Objetivos: Investigar a aplicacao de uma membrana biologica, constituida de cortical ossea bovina descalcificada, em cirurgias de coluna vertebral de ratos, com o intuito de tratar o defeito osseo minimizando ou impedindo a herniacao do tecido muscular para dentro do canal raquideano, inibindo a formacao de fibrose pos-operatoria e avaliar a biocompatibilidade do material. Metodos: A membrana biologica de cortical ossea bovina descalcificada - que tem ampla aplicacao em odontologia para cobertura de implantes dentarios, ou como barreira biologica nos setores de bucomaxilo, ortopedia e traumatologia, cirurgia plastica estetica e reparadora, cirurgia facial e oncologia - serviu ao uso em laminectomias lombares e toracicas, executadas em ratos Wistar-EPM, que apos intervalos de oito, dezesseis e vinte e quatro semanas, foram sacrificados, sendo removidas as pecas cirurgicas para analise anatomopatologica. Resultados: Os resultados obtidos da analise microscopica do material submetido a Hematoxilina e Eosina, divididos em grupos de acordo com o tempo de sacrificio e presenca ou ausencia de implante apresentou um comportamento semelhante sem diferencas estatisticamente significantes, porem com algumas percentagens apresentando diferencas significativas, o que sugere uma possivel diferenca de comportamento entre os grupos quanto a presenca ou ausencia de reconstituicao do tecido. Conclusoes: A membrana biologica liofilizada de cortical ossea bovina evitou a herniacao do tecido muscular para o canal raquideano, sendo totalmente reabsorvida em todas as pecas analisadas, demonstrando sua biocompatibilidade e favorecendo a neoformacao ossea e evitando aderencias
- ItemRestritoInteração da Sakuranetina em filmes de Langmuir contendo lipídios insaturados(Universidade Federal de São Paulo, 2023-10-17) Souza, Matheus Lima de [UNIFESP]; Caseli, Luciano [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/8929162910172931; https://lattes.cnpq.br/1708239824339856Este projeto investigou a interação de sakuranetina, um flavonoide de promissora atividade farmacêutica, com monocamadas de fosfolipídios insaturados que serviram para mimetizar membranas celulares. Os fosfolipídios empregados foram o 2-Oleoil-1-palmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina (POPC) e 2-Oleoil-1-palmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina (POPE). As monocamadas puras e mistas com o bioativo foram avaliadas através de experimentos de pressão superficial, microscopia no ângulo de Brewster (BAM) e espectroscopia de reflexão-absorção no infravermelho com modulação da polarização (PM-IRRAS). Os resultados permitem concluir que a sakuranetina apresenta interação com os fosfolipídios, devido a expansão dos filmes monomoleculares. O POPC sofreu redução na estabilidade e diminuição da elasticidade superficial frente a esse bioativo, provavelmente causados por rearranjos moleculares na interface. Interações são verificadas por PM-IRRAS entre o flavonoide e a porção polar e apolar do POPC. A contribuição viscosa ao filme misto diminuiu, diferentes domínios de densidade foram exibidos por BAM e histerese relevante não foi identificada. O POPE sofreu pequena redução da estabilidade termodinâmica, indicando que poucos rearranjos aconteceram na monocamada. Poucas agregações vistas nas imagens do BAM estão presentes na interface. Sakuranetina também aumentou a rigidez deste lipídio, mas a monocamada permaneceu essencialmente elástica e facilmente espalhável na superfície, tal qual o primeiro lipídio. Os resultados de PM-IRRAS indicaram interações com a porção polar e apolar do POPE, o que explica a expansão da monocamada. Isto posto, os dados permitem supor que a sakuranetina foi mais bem incorporada na camada monomolecular de POPE, e que membranas com POPC experienciariam maior interação e desestabilização na presença deste flavonoide.