Navegando por Palavras-chave "Metabólitos secundários"

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    Análise do perfil cromatográfico de metabólitos secundários produzidos por fungos do gênero Aspergillus spp.
    (Universidade Federal de São Paulo, 2022-12-20) Silva, Richard Maciente Silvino da [UNIFESP]; Batista, Wagner Luiz [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/4373797404389169; https://lattes.cnpq.br/1850973447782928
    Fungos filamentosos são seres vivos com uma riqueza biológica vasta, com milhões de espécies existentes com características diversas tanto entre si quanto entre membros da mesma espécie. Eles são capazes de produzir uma grande amálgama de produtos naturais bioativos na forma de metabólitos secundários, produtos de baixo peso molecular e ampla variedade química e de origens metabólicas. Estas características de seus metabólitos são de grande importância tanto para a vida fúngica, que pode ter sua capacidade de esporulação e sobrevivência em um ambiente auxiliada pelos metabólitos secundários que produz, quanto para os humanos, capazes de fazer uso destes metabólitos na busca de tratamentos para diversas condições, dentre muitos outros usos. Uma destas condições é a leishmaniose, doença tropical negligenciada que aflige milhões de pessoas ao redor do mundo, e cuja falta de tratamentos viáveis é um problema de saúde de ampla escala para a população mundial e, em particular, brasileira. Na busca por identificação química dos produtos naturais de um fungo com potencial uso no tratamento desta doença, foi realizada extração dos metabólitos de múltiplas cepas de Aspergillus fumigatus em acetato de etila e identificação de seus espectros de ultravioleta e visível para identificação de sua absorção de radiação e comparação na produção de metabólitos entre cepas distintas de fungos da espécie, através das quais foi possível identificar que, mesmo sob as mesmas condições de cultivo e extração deles, houve produção de moléculas distintas, podendo explicar as atividades diferentes destes metabólitos contra Leishmania spp., bactérias e células tumorais.
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    Atividade citotóxica de secretoma de Aspergillus fumigatus em células de carcinoma de pulmão
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-12-21) Sousa, Ana Cristina Peres de [UNIFESP]; Colombo, Arnaldo Lopes [UNIFESP]; Xafranski, Hemílio [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/6365132166365924; http://lattes.cnpq.br/4512261018429681; http://lattes.cnpq.br/2185359879862979; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Introduction Aspergillus fumigatus is a fungi with high adaptive capacity and virulence factors that favors its establishment and colonization in the human host. Species of Aspergillus genus are recognized for its high capacity for production of secondary metabolites, extensively documented in the literature. Among these metabolites, there are some isolated molecules used as drugs, for the cholesterol control (lovastatin) and even in the combat of other fungi (echinocandins). Several molecules produced by A. fumigatus have already been tested on human cells/ in vitro cells searching for bioactive molecules. Gliotoxin is one of the most studied A. fumigatus molecule, that inhibits the host immune response, negatively modulating angiogenesis and inducing many cell lines to apoptosis. In view of the great diversity of molecules produced by A. fumigatus, the interest to explore its biological potential focusing on cytotoxic activity in lung carcinoma cells, the target organ of infection by this agent in the human host is justified. Objective To obtain the secretome from clinical isolates of A. fumigatus and investigate the potential cytotoxic activity of its fractions on A549 cells. Methodology Six clinical isolates of A. fumigatus from patients with pulmonary aspergillosis were identified at species level using a polyphasic approach, including ITS region, Calmodulin and β-tubulin genes sequencing. After standardization of the optimal conditions to obtain secretomes samples with reproducible composition (same profile when evaluated by LC-MS), we started the screening for biological activity of these molecules in A549 cells through cytotoxicity assays in which measurement of metabolic activity was done by the 3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide salt (MTT) assay. Once that the most active secretome was identified, it was submitted to sequential fractionations through preparative Liquid Chromatography (LC), with the aim of purifying the fraction that was responsible for the cytotoxic effect found. Finally, annexin V cell death assays were performed to analyse the cell death pattern induced by the active subfraction. Result The standardization of A549 cell culture and secretome extraction in MMBA culture medium of reproducible composition was successfully achieved. Regarding the biological activity of secretome samples from 6 A. fumigatus isolates, the isolate 934 was presented the highest cytotoxic effect in MTT assays. From this finding, 2 sequential secretome fractionations were performed and it was possible to isolate a subfraction identified as Z5, which presented consistent cytotoxic activity, reducing 90% of cell viability when compared to control (p <0.02). The annexin V assay has led to the conclusion that this subfraction mainly induces apoptosis in A549 cells. New assays are needed to characterize the A. fumigatus secretome subfraction that presented cytotoxic activity as well as to confirm its potential antitumor activity.
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    Bioprospecção do potencial antimicrobiano, antiparasitário e antitumoral de metabólitos secundários produzidos por fungos do gênero Aspergillus Spp.
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2018-06-28) Calado, Juliana Cristina Pereira [UNIFESP]; Batista, Wagner Luiz [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/4373797404389169; http://lattes.cnpq.br/4353724670961832; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Filamentous fungi produce a wide variety of secondary metabolites that have a significant impact on society. Some metabolites are exploited by their activity as antibiotics and drugs; others are involved in diseases, in the interaction of fungi with plants and animals. In this context, the objective of this work was to obtain biologically active secondary metabolites produced by fungi isolated from the composting of the Fundação Zoológico de São Paulo (FPZSP). In this study, 71 organic extracts were used, 60 filamentous fungi and 11 yeasts. Of the 71 analyzed samples 25 presented antimicrobial activity in disc diffusion assays, and 23 samples showed activity against Staphylococcus aureus, 15 against Bacillus cereus and only one sample (I75) showed activity against Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. The minimum inhibitory concentration (MIC) values were determined by microdilution in broth. Four of these samples had good antimicrobial activity (MIC 62.5 μg / mL) and 7 showed moderate activity (100500 μg / mL). Four samples showed antitumor activity with selectivity varying from 1.8 to 7.5 times. The best results were obtained for the activity against Leishmania (Leishmania) amazonensis. In the tests of leishmanicidal activity against the promastigote forms, 12 samples presented IC50 values equal to or less than 5 μg / mL, of which 3 showed good selectivity against the parasite in relation to the murine fibroblast lineage (values ranging from 5 to 50 times). Similar results for leishmanicidal activity against amastigote forms were observed in two of these extracts (I06 and I75). The I06 extract induced cell death by mitochondrial apoptosis and ROS production in the promastigote forms of L. (L.) amazonensis. The therapeutic potential of the organic extract of isolate I06 in cutaneous leishmaniasis model was also evaluated. BALB / c mice infected with L. (L.) amazonensis and treated with I06 extract showed a significant reduction in the lesion size in the paw as well as the parasite load. No signs of hepatic or renal toxicity were observed from histological analyzes and evaluation of serum levels of some biochemical markers. For the identification of the fungal species used in this study, partial sequencing of the intergenic region (STI) of ribosomal DNA and a region of the calmodulin gene was performed. All isolates with some biological activity belong to different strains of Aspergillus fumigatus. Thus, this dataset strongly suggests that a molecule or set of organic extract molecules from secondary metabolites of A. fumigatus (isolated I06) has leishmanicidal activity with high selectivity and low toxicity, thus presenting great potential for therapeutic use.
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    Estudos de indução biossintética a partir de co-culturas microbianas em Penicillium sp.CML-3020
    (Universidade Federal de São Paulo, 2023-11-28) Rivero, Milena Patrícia Salgado [UNIFESP]; Medeiros, Lívia Soman de [UNIFESP]; Veiga, Thiago André Moura [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/8190975614526360; http://lattes.cnpq.br/7404733691134037; https://lattes.cnpq.br/5715081698604930
    Dada a busca contínua de agentes terapêuticos de origem natural, a exploração do metabolismo secundário de espécies Penicillium hoje representa um potencial promissor para novas descobertas. Neste contexto, investigações a respeito da quimiodiversidade de metabólitos produzidos por Penicillium sp.CML-3020, uma nova espécie isolada de Mata Atlântica foi o principal alvo de estudo desta pesquisa. Através da implementação de co-culturas de Penicillium sp.CML-3020 com outras espécies fúngicas e de seu cultivo de forma axênica, foi investigada a potencialidade da produção de metabólitos fúngicos bioativos. A investigação dos micro-extratos obtidos foi realizada pela análise de dados obtidos em cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas de alta resolução (HPLC-DAD-HRMS). Através da inspeção de massas acuradas e consultas a bancos de dados de Produtos Naturais, foi realizada a desreplicação química dos compostos biossintetizados por Penicillium sp.CML-3020. A indução metabólica e um aumento significativo de alguns compostos foram observados quando esta especie foi submetido ao crescimento conjunto com Penicillium limosum, Penicillium setosum e Penicillium sp.CMLD-16, evidenciando assim a possível ativação de genes crípticos responsáveis pela codificação e síntese de metabólitos secundários produzidos por Penicillium sp.CML-3020. A partir do cultivo axênico para avaliação do perfil metabólico deste microorganismo, foram isoladas três substâncias identificadas como esclerodina (1), mistura epimérica de uma dicetoacetonilfenalenona (2) e derivado 9-desmetil de FR-901235 (3); que foram submetidos a ensaios antimicrobianos contra bactérias e fungos patogênicos em humanos.