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- ItemAcesso aberto (Open Access)Captura de anticorpos monoclonais anti-IgG humana a partir de sobrenadante de cultura celular por precipitação com polietilenoglicol e cloreto de zinco(Universidade Federal de São Paulo, 2023-02-24) Pássaro, Ana Carolina Moreno [UNIFESP]; Bresolin, Igor Tadeu Lazzarotto [UNIFESP]; Bresolin, Iara Rocha Antunes Pereira [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/5925807286464060; http://lattes.cnpq.br/5750111176589237; http://lattes.cnpq.br/1973730368476455Os anticorpos monoclonais (mAbs) são biomoléculas que se tornaram fundamentais em diversas áreas de estudo, sendo capazes de reconhecer analitos em uma mistura complexa e, desta forma, contribuir em dispositivos de detecção e diagnóstico médico, como os testes imunodiagnósticos rápidos. Estes testes utilizam, como um de seus reagentes de captura, anticorpos do tipo anti-IgG humana que atuam no processo de detecção de IgG policlonal no sangue de indivíduos humanos. Neste sentido, este trabalho teve como finalidade estudar a técnica de precipitação com polietilenoglicol (PEG) e ZnCl2 como alternativa não-cromatográfica de captura para mAbs de aplicações não-terapêuticas, porém que ainda requerem alto grau de pureza, tal como os utilizados em testes imunodiagnósticos. Os experimentos foram conduzidos utilizando PEG de diferentes massas moleculares e concentrações (4000 e 6000 g mol-1, variando de 0 a 16% m/v) e ZnCl2 (0 a 16 mmol L-1) como agentes precipitantes para mAbs IgG1 de camundongo do tipo anti-IgG humana provenientes de sobrenadante de cultura celular de hibridomas, determinando-se suas curvas de solubilidade e as condições mais promissoras para precipitação em batelada, além de otimizar a etapa de ressuspensão e realizar uma análise de viscosidade para os anticorpos ressuspensos. A concentração de anticorpos foi avaliada por cromatografia de afinidade analítica com proteína A imobilizada em matriz sólida e em eluição gradiente em HPLC (High Performance Liquid Chromatography), estimando-se a pureza dos precipitados por cromatografia por exclusão de tamanho em eluição isocrática, também em HPLC. Os experimentos resultaram na obtenção de um precipitado com rendimento de 100% e pureza de 15% (obtido por precipitação com PEG6000 14%) e de um precipitado de 100% de rendimento e 59% de pureza (obtido por precipitação com PEG6000 12% combinado com ZnCl2 3 mmol L-1). A análise de viscosidade indicou que a combinação de PEG6000 e ZnCl2 como agentes precipitantes não permitiu uma redução da viscosidade dinâmica do sobrenadante de precipitação (5,96 mPa s) quando comparado ao sobrenadante obtido com apenas PEG6000 (5,71 mPa s), embora tenha resultado em um precipitado com viscosidade menor (2,41 mPa s) que a do sobrenadante. Visto que a pureza máxima obtida foi de cerca de 60%, para que os mAbs se tornem elegíveis para a aplicação mencionada (pureza mínima de 98%), recomenda-se a complementação com outro método de purificação, bem como a possibilidade do uso de pré-operações de concentração do material de partida.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Estudo de copolímeros conjugados em líquido iônico(Universidade Federal de São Paulo, 2018-03-27) Pesco, Beatriz [UNIFESP]; Philadelphi, Laura Oliveira Peres [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Conjugated polymers are widely studied materials due to their diversity in applications. However, its rigidity gives the material low solubility. One strategy to solve this problem is to insert flexible groups into the insoluble conjugate material. In this context, the present work presents the synthesis of a block polymer, which is composed of intercalated conjugated and non-conjugated segment, derived from poly(p-phenylene vinylene) (PPV) and poly (ethylene oxide) (PEG). The material was synthesized and characterized by infrared, UV-Vis and fluorescence and the results showed a better solubility of the block polymer in organic solvent forms without loss or alteration of its adsorption and emission good. This material was incorporated into the ionic liquid (LI) butyltrimethyl ammonium bitrifloromethanesulfonylideide in proportions of 1: 1 and 3: 1 (polymer mass ratio / LI). The results obtained with X-ray diffraction show that the block material was crystalline and when the insertion of the ionic liquid it was observed in decrease of this crystallinity. It was also observed difference in absorption, emission, DSC and TGA files, showing that there is an interaction between the block polymer material and the ionic liquid, which promoted improvement in the emission intensity and greater thermal stability.