Navegando por Palavras-chave "Promotores constitutivos"

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    Novos promotores constitutivos de cana-de-açúcar: caracterização in silico, isolamento e amplificação
    (Universidade Federal de São Paulo, 2022-07-29) Silva, Vinícios Henrique [UNIFESP]; Brito, Michael dos Santos [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/1357542636768944; http://lattes.cnpq.br/8762934035478895
    A Biotecnologia Vegetal, através do desenvolvimento de plantas geneticamente modificadas (GMs) possibilita a incorporação de características vantajosas e de interesse em variedades comerciais. No momento onde há uma demanda global por novas fontes renováveis de geração de energia somado ao aumento populacional e a necessidade crescente da produção global de alimentos, as plantas GMs podem contribuir mitigando ou minimizando os impactos ambientais e a expansão das fronteiras agrícolas, através de culturas de maior resistência, produtividade e adaptadas às diferentes condições climáticas e estressoras. Dentre as sequências responsáveis por controlar expressão, momento e local dos genes, os promotores constitutivos, em específico, são responsáveis pela regulação de genes cuja expressão ocorre ininterruptamente nos diferentes tecidos e estágios de desenvolvimento da planta. Dessa forma, o presente estudo visou caracterizar e avaliar in sílico novos promotores constitutivos da Cana-de-Açúcar (Saccharum spp.), bem como, seus homólogos em Sorgo (Sorghum bicolor) e Milho (Zea mays), para o desenvolvimento de novos vetores de transformação eficientes inicialmente para gramíneas, mas com possibilidade de uso em outras plantas. A partir de banco de dados genômicos e transcriptômicos, específicos para a Cana e espécies correlatas, foram identificados 10 genes constitutivos, cuja expressão foi validada através de ferramentas online, como BAR e Northern Virtual. A partir dessas análises, os genes que codificam: Fator de Alongamento 1 Delta 1, Proteína Homóloga ao Fator de Tradução SUI 1 e Arginina tRNA Ligase da cana-de-açúcar demonstraram os melhores perfis de expressão, quando comparados aos demais genes e à Actina. A partir destes, foram obtidas sequências promotoras, analisados os sítios para ligação de Fatores de Transcrição (FT), bem como presença de regiões conservadas e repetitivas entre elas. Posteriormente, foram desenhados e avaliados primers que por sua vez foram utilizados na amplificação da região promotora dos candidatos através da PCR, cujos resultados foram verificados através de Eletroforese em Gel de Agarose e por fim, foi quantificado a amostra de DNA obtida. Portanto, os objetivos estabelecidos inicialmente pelo estudo foram atingidos, ao mesmo tempo, abrindo possibilidades para estudos posteriores relacionados à caracterização e validação de novos promotores constitutivos para a Engenharia Genética de Plantas.