Navegando por Palavras-chave "Veneno"

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    Análise do dimorfismo sexual em venenos da aranha acanthoscurria juruenicola por peptidômica quantitativa
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2018-06-28) Almeida, Erika Sayuri Nishiduka Costa De [UNIFESP]; Tashima, Alexandre Keiji [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/3395922547042342; http://lattes.cnpq.br/9963736748632144; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Os aracnídeos estão entre os grupos de maior sucesso evolutivo da história do planeta, e um dos fatores de maior importância para isso é a produção de um veneno farmacologicamente complexo, composto por uma coleção de proteínas e peptídeos biologicamente ativos e altamente específicos. Apesar dos peptídeos constituírem grande parte da composição dos venenos, estudos peptidômicos ainda são escassos, consequentemente as identidades e atividades biológicas de muitos desses peptídeos permanecem desconhecidas. Além disso, em diversas espécies de aranhas é observado dimorfismo sexual, o que pode ocasionar diferenças nas composições de venenos de machos e fêmeas. O objetivo deste trabalho foi caracterizar e comparar quantitativamente o perfil peptídico do veneno de espécimes machos e fêmeas da aranha Acanthoscurria juruenicola. Peptídeos nativos foram fracionados por extração em fase sólida e analisados por espectrometria de massas, assim como seus fragmentos gerados pela digestão isolada por 5 enzimas distintas (tripsina, quimotripsina, termolisina, GluC e Aspn). Os dados espectrais foram submetidos a análise de novo, busca em banco de dados de transcriptoma de glândula e sobreposição das clivagens utilizando ferramentas de bioinformática. Dentre 11 sequências maduras de toxinas completamente mapeadas, 8 eram novos peptídeos ricos em cisteínas, apresentando entre 3 a 5 ligações dissulfeto. Buscas em bancos de sequências de A. geniculata e Araneae resultaram em mais 24 proteínas homólogas identificadas. Observamos dimorfismo sexual no veneno: a concentração total de toxinas nos venenos das fêmeas foi aproximadamente 5 vezes superior à dos machos e apresentaram peptídeos com significativa expressão diferencial. Uma das toxinas de maior expressão em fêmeas, a U2TRTXAj1b, de massa molecular 4,9 kDa e 3 ligações dissulfeto, foi fracionada por cromatografia de filtração em gel. Essa toxina apresentou atividade citotóxica contra aproximadamente 44% das células de melanoma da linhagem A375 em ensaios de MTT em concentração de 3,8 μM. Esses resultados podem evidenciar diferenças em toxicidade e comportamento biológico de acordo com o gênero do animal, além de embasar a potencial aplicação biotecnológica desses peptídeos na área farmacológica.
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    Desenho de peptídeos bioativos a partir de toxinas do peixe thalassophryne nattereri
    (Universidade Federal de São Paulo, 2024-06-28) Cena, Gabrielle Lupeti de [UNIFESP]; Conceição, Katia da [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/5360223612968931; http://lattes.cnpq.br/4624100984041869
    O potencial terapêutico de peptídeos derivados de venenos, como peptídeos bioativos (PBs), é determinado pela especificidade, estabilidade e propriedades farmacocinéticas. PBs, incluindo os peptídeos antimicrobianos (PAMs) e peptídeos de penetração celular (PPCs), compartilham diversas propriedades físico-químicas características e são alternativas potenciais para terapias baseadas em antibióticos e entrega de medicamentos, respectivamente. Este estudo utilizou métodos in silico para prever PAMs e PPCs derivados de natterinas encontradas no veneno do peixe Thalassophryne nattereri. Cinquenta e sete PBs (19 PAMs, 8 PPCs e 30 PAMs/ PPCs) foram identificados utilizando os servidores web CAMP, AMPA, AmpGram, C2Pred e CellPPD. As propriedades físico-químicas foram analisadas usando ProtParam, PepCalc e DispHred. O potencial de ligação à membrana e a localização celular de cada peptídeo foram analisados usando os servidores web APD3 e TMHMM. Todos os PPCs e 2 PAMs exibiram alto potencial de ligação à membrana, e 54 peptídeos estavam localizados na membrana plasmática. Imunogenicidade, toxicidade, alergenicidade e parâmetros ADMET foram avaliados utilizando vários servidores web. Dezesseis peptídeos antivirais e 37 peptídeos anticancerígenos foram preditos utilizando os servidores da web Meta-iAVP e ACPred. Estruturas secundárias e projeções de rodas helicoidais foram previstas utilizando os servidores web PEP-FOLD3 e Heliquest. Quatro peptídeos com características promissoras foram sintetizados e submetidos a ensaios in vitro antimicrobianos, antivirais e citotóxicos, demonstrando inibição significativa do crescimento microbiano e replicação viral sem mostrar toxicidade para células de fibroblastos murinos. Além disso, a toxicidade dos peptídeos sintetizados foi avaliada em Galleria mellonella, exibindo viabilidade acima de 80%. Estes resultados sugerem que esta abordagem metodológica tem o potencial de auxiliar a pesquisa e desenvolvimento de agentes antimicrobianos, oferecendo uma abordagem mais rápida, econômica e personalizada para combater infecções microbianas, incluindo aquelas causadas por patógenos resistentes a antibióticos. Além disso, representa uma descoberta nova e promissora em veneno de peixe.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Identificação e análise da atividade antimicrobiana dos peptídeos sintéticos Tn CRT derivados da sequência CART isolada de Thalassophryne nattereri
    (Universidade Federal de São Paulo, 2022-02-09) Silva, Verônica Andrade [UNIFESP]; Conceição, Katia [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/5360223612968931; http://lattes.cnpq.br/8368562378017150
    O surgimento de resistência bacteriana pelo uso indiscriminado de antibióticos justifica a necessidade do desenvolvimento de novos agentes bioativos. Nesse contexto, os peptídeos antimicrobianos são altamente úteis para o gerenciamento de cepas microbianas resistentes. Neste estudo, relatamos o isolamento e a caracterização de peptídeos obtidos do veneno do peixe-sapo Thalassophryne nattereri. Esses peptídeos foram ativos contra bactérias Gram-positivas,Gram-negativas e fungos. As sequências de aminoácidos primários mostraram semelhança com os peptídeos de transcrição regulada por cocaína e anfetamina (CART), e dois análogos de peptídeo - Tn CRT2 e Tn CRT3 - foram projetados usando o algoritmo AMPA baseado nessas sequências. Os análogos foram submetidos a ensaios antimicrobianos e foram biologicamente ativos em concentrações variando de 2,1 a 13 µM. A toxicidade de Tn CRT2 e Tn CRT3 foi analisada in vitro usando um ensaio hemolítico e redução de sal de tetrazólio em fibroblastos e foi considerada significativa apenas em altas concentrações (até 40 µM). Os testes de infecção in vivo demonstraram a eficácia dos peptídeos para inibição da infecção causada por E. coli e P. aeruginosa. Nossos dados sugerem que a abordagem metodológica é eficiente para projetar candidatos para estudos posteriores sobre o desenvolvimento de novos antibióticos peptídicos que poderiam ajudar a combater infecções bacterianas e também representa uma descoberta nova e interessante para os venenos de peixes.