Envolvimento das proteínas fosforiladas no resíduo de tirosina no hipocampo de ratos submetidos ao status epilepticus induzido por pilocarpina
Data
2016-02-06
Autores
Castro Neto, Eduardo Ferreira de 
Orientadores
Mazzacoratti, Maria da Graca Naffah
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
Protein phosphorylation on tyrosine residue has been associated with different pathologies in the nervous system, including temporal lobe epilepsy. Objective: The objective of this work was to identify the phosphotyrosine proteins involved in status epilepticus (SE) onset/maintenance and those linked to SE resistance in animals submitted to pilocarpine-induced epilepsy. Method: Three groups of animals were studied: SE Group (rats with 5 h of SE, n-=5); PSS group (pilocarpine-injected animals that did not develop SE, n=5) and Control Group (saline-treated rats, n=5). The hippocampi were isolated and submitted to proarray kit, (Full Moon BioSystems, Inc.) containing specific antibodies to identify 228 phosphoproteins. Data were analyzed using ANOVA and Tukey- Kramer as post-test and p ? 0.05 was accepted. Results: One hundred twenty three out of 228 phosphoproteins presented significant altered levels among groups. From these 123 phosphoproteins, 36 attracted our attention due to their important particularities, that is, 18 presented increased phosphorylation compared to control and non-SE groups, 12 from non-SE group displayed significant differences when compared to control and SE groups and 6 presented altered levels among all groups. Conclusion: In this study we identified proteins that are probably linked to the generation of SE from those linked to the SE resistance. Knowing pathways involved in epileptogenesis may help to understand the mechanisms responsible for different vulnerabilities to long-lasting seizures.
A fosforilação de proteínas no resíduo de tirosina tem sido associada à diferentes patologias no sistema nervoso, incluindo a epilepsia do lobo temporal. O objetivo deste trabalho foi identificaras proteínas fosfotirosinas envolvidas no status epilepticus (SE) no início/manutenção e quais proteínas estão envolvidas com a resistência ao SE em animais submetidos ao modelo de epilepsia induzido por pilocarpina. Método: Três grupos de animais foram estudados: grupo SE (ratos com 5 h de SE n = 5); Grupo PSS ou (animais tratados com pilocarpina e que não desenvolveram SE, n = 5) e o grupo Controle (ratos tratados com salina, n = 5). Os hipocampos foram isolados e submetidos à técnica de proarray (kit, Full Moon Biosystems, Inc.) contendo anticorpos específicos para identificar 228 resíduos de tirosina fosforilados em proteínas. Os dados foram analisados por análise de variância seguido do pósteste de Tukey-Kramer considerando p ? 0,05. Resultados: Cento e vinte e três de 228 resíduos de tirosina das proteínas apresentaram níveis alterados significantemente entre os grupos. A partir destes 123 resíduos, 36 atraíram a nossa atenção devido às suas particularidades importantes, ou seja, 18 apresentaram aumento da fosforilação em comparação ao grupo controle e PSS, 12 do grupo PSS exibiram diferenças significativas quando comparado ao grupo controle e SE e 6 apresentaram níveis alterados entre todos os grupos estudados. Conclusão: Neste estudo identificamos proteínas que provavelmente estão ligadas à geração de SE e também proteínas envolvidas com a resistência ao SE. Conheceras vias envolvidas na epileptogênese pode ajudar a compreender os mecanismos responsáveis por diferentes vulnerabilidades a crises de longa duração.
A fosforilação de proteínas no resíduo de tirosina tem sido associada à diferentes patologias no sistema nervoso, incluindo a epilepsia do lobo temporal. O objetivo deste trabalho foi identificaras proteínas fosfotirosinas envolvidas no status epilepticus (SE) no início/manutenção e quais proteínas estão envolvidas com a resistência ao SE em animais submetidos ao modelo de epilepsia induzido por pilocarpina. Método: Três grupos de animais foram estudados: grupo SE (ratos com 5 h de SE n = 5); Grupo PSS ou (animais tratados com pilocarpina e que não desenvolveram SE, n = 5) e o grupo Controle (ratos tratados com salina, n = 5). Os hipocampos foram isolados e submetidos à técnica de proarray (kit, Full Moon Biosystems, Inc.) contendo anticorpos específicos para identificar 228 resíduos de tirosina fosforilados em proteínas. Os dados foram analisados por análise de variância seguido do pósteste de Tukey-Kramer considerando p ? 0,05. Resultados: Cento e vinte e três de 228 resíduos de tirosina das proteínas apresentaram níveis alterados significantemente entre os grupos. A partir destes 123 resíduos, 36 atraíram a nossa atenção devido às suas particularidades importantes, ou seja, 18 apresentaram aumento da fosforilação em comparação ao grupo controle e PSS, 12 do grupo PSS exibiram diferenças significativas quando comparado ao grupo controle e SE e 6 apresentaram níveis alterados entre todos os grupos estudados. Conclusão: Neste estudo identificamos proteínas que provavelmente estão ligadas à geração de SE e também proteínas envolvidas com a resistência ao SE. Conheceras vias envolvidas na epileptogênese pode ajudar a compreender os mecanismos responsáveis por diferentes vulnerabilidades a crises de longa duração.
Descrição
Citação
CASTRO NETO, Eduardo Ferreira de. Envolvimento das proteínas fosforiladas no resíduo de tirosina no hipocampo de ratos submetidos ao status epilepticus induzido por pilocarpina. 2016. 155 f. Tese (Doutorado em Neurologia - Neurociências) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2016.