Avaliação dos gens atg8,ams1 e hrr25 do patógeno cryptococcus neoformans: impactos sobre os fatores de virulência e autofagia
Data
2016-08-31
Autores
Lima, Ricardo Ferreira 
Orientadores
Pascon, Renata Castiglioni Pascon
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
Invasive fungal infections (IFES) increase exponentially in recent years. The IFIs are difficult to treat due to limited options of antifungals, especially cryptococcosis, which presents itself as an infection that causes high mortality in immunocompromised individuals affected by AIDS, transplant or undergoing chemotherapy. The etiological agent of this disease; Cryptococcus neoformans is an opportunistic yeast that besides the medical importance, it is also an excellent biological study model. This micro-organism is easy to grow and genetically manipulate that enable the analysis of the molecular attributes related to pathogenesis. C. neoformans expressed many virulence factors during the infection process, among these, the thermotolerance that enables it to develop at 37°C. In this yeast it was isolated and characterized the mutant ape4 unable to grow at 37°C. The APE4 protein is involved in Cytoplasm to Vacuole Targeting (Cvt) process and autophagy, in Saccharomyces cerevisiae. In S. cerevisiae there are seven proteins involved in the Cvt process (HRR25, ATG8, ATG11, ATG19, APE1, APE4 e AMS1). Using these S. cerevisiae sequences to browse the C. neoformans database at the Broad Institute, we found only 4 sequences (ATG8, AMS1 e HRR25) that are homolog to S. cereivisiae. Therefore, the objective of this study is to explore the biological function of the 3 proteins in C. neoformans relating them to the capacity of this yeast grow at physiological temperature of mammals and autophagy. Moreover, the study of HRR25 coding gene will be further explored using the Degron technique, which is currently being established in C. neoformans.
Infecções fúngicas invasivas (IFIs) aumentaram exponencialmente nos últimos anos. As IFIs são de difícil tratamento em decorrência da escassez de antifúngicos, em especial a criptococose, que se apresenta como uma infecção que causa grande mortalidade em indivíduos imunocomprometidos acometidos por AIDS, transplantados ou submetidos à quimioterapia. O agente etiológico desta doença, Cryptococcus neoformans, é uma levedura oportunista que, além da importância médica, é também um excelente modelo de estudo biológico. Este micro-organismo é de fácil cultivo e manipulação, é geneticamente maleável e pode ser manipulado por meio de várias ferramentas biotecnológicas que possibilitam a análise dos atributos moleculares que desencadeiam sua patogênese. C. neoformans expressa muitos fatores de virulência durante o processo de infecção, dentre estes, a termotolerância, que permite que ele se desenvolva a 37°C. Em C. neoformans foi isolado e caracterizado o mutante ape4 que é incapaz de crescer a 37°C. Em Saccharomyces cerevisiae APE4 está envolvido em processos de Cvt (Cytoplasm to Vacuole Targeting) e autofagia. Em S. cerevisiae há pelo menos sete proteínas envolvidas no processo Cvt. Empregando essas sequencias exploramos o banco de dados do genoma de C. neoformans depositado no Broad Institute e com isso identificamos 4 sequências que codificam os genes ATG8, AMS1 e HRR25. Portanto, o objetivo deste trabalho foi explorar a função biológica dessas proteínas em C. neoformans relacionando-as com a capacidade de esta levedura crescer na temperatura fisiológica de mamíferos e com o processo de autofagia. Além disso, o estudo do gene que codifica a proteína HRR25 está associado com a implantação da técnica Degron em C. neoformans.
Infecções fúngicas invasivas (IFIs) aumentaram exponencialmente nos últimos anos. As IFIs são de difícil tratamento em decorrência da escassez de antifúngicos, em especial a criptococose, que se apresenta como uma infecção que causa grande mortalidade em indivíduos imunocomprometidos acometidos por AIDS, transplantados ou submetidos à quimioterapia. O agente etiológico desta doença, Cryptococcus neoformans, é uma levedura oportunista que, além da importância médica, é também um excelente modelo de estudo biológico. Este micro-organismo é de fácil cultivo e manipulação, é geneticamente maleável e pode ser manipulado por meio de várias ferramentas biotecnológicas que possibilitam a análise dos atributos moleculares que desencadeiam sua patogênese. C. neoformans expressa muitos fatores de virulência durante o processo de infecção, dentre estes, a termotolerância, que permite que ele se desenvolva a 37°C. Em C. neoformans foi isolado e caracterizado o mutante ape4 que é incapaz de crescer a 37°C. Em Saccharomyces cerevisiae APE4 está envolvido em processos de Cvt (Cytoplasm to Vacuole Targeting) e autofagia. Em S. cerevisiae há pelo menos sete proteínas envolvidas no processo Cvt. Empregando essas sequencias exploramos o banco de dados do genoma de C. neoformans depositado no Broad Institute e com isso identificamos 4 sequências que codificam os genes ATG8, AMS1 e HRR25. Portanto, o objetivo deste trabalho foi explorar a função biológica dessas proteínas em C. neoformans relacionando-as com a capacidade de esta levedura crescer na temperatura fisiológica de mamíferos e com o processo de autofagia. Além disso, o estudo do gene que codifica a proteína HRR25 está associado com a implantação da técnica Degron em C. neoformans.
Descrição
Citação
LIMA, Ricardo Ferreira. Avaliação dos gens atg8,ams1 e hrr25 do patógeno cryptococcus neoformans: impactos sobre os fatores de virulência e autofagia. 2016. 129 f. Dissertação (Mestrado) - Instituto de Ciência e Tecnologia, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São José dos Campos, 2016.