Efeito do hialuronato de sódio na migração e proliferação do epitélio de córnea humana.
Data
2000
Autores
Gomes, José Álvaro Pereira 
Orientadores
Campos, Mauro Silveira de Queiroz
Tipo
Tese de doutorado
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Resumo
Introdução: O hialuronato de sódio (HS) e um constituinte da matriz extracelular, que parece estimular a migração, adesão e proliferação epitelial corneal em coelhos. No entanto, controversias ainda persistem sobre os mecanismos da acao do HS nestas funcoes. Objetivos: Avaliar o efeito do HS exogeno na migracao e proliferacao das celulas epiteliais corneais humanas cultivadas in vitro; avaliar se a presenca do HS exogeno altera a expressao do receptor do HS, CD44, nessas celulas e avaliar inducao de apoptose celular pelo HS. Material e Metodos: Tres culturas de celulas epiteliais (n=l7) de diferentes corneas humanas foram selecionadas e separadas aleatoriamente para receber: 1. meio de cultura com HS diluido a O,6mg/ml; 2. meio enriquecido com hidroxipropilmetilcelulose (HM) 2,5mg/ml para obter viscosidade semelhante a do HS utilizado e 3. apenas meio de cultura (Controle). As culturas foram avaliadas por microscopia invertida por um observador mascarado. Medidas de area de crescimento foram obtidas para determinar migracao epitelial nos dias 4, 8, 12 e 16. Repetiu-se o primeiro experimento e, ao final do 16§ dia, celulas epiteliais dos grupos HS, HM e Controle de corneas diferentes (n=5) foram suspensas e enviadas para avaliacao de proliferacao por citometria de fluxo, pelo uso de iodeto de propidium (IP) e por imunohistoquimica, utilizando-se o anticorpo Ki-67 (n=6); avaliacao imunohistoquimica para deteccao de CD44 (n=5) e teste de apoptose, utilizando o corante Hoechst (n=6). As comparacoes entre os 3 grupos de estudo foram realizadas pela ANOVA para medidas repetidas para migracao e teste de Friedman pa ra proliferacao por IP e Ki-67, receptor CD44 e apoptose. Resultados: A analise da area de migracao epitelial das culturas dos grupos HS, HM e Controle mostrou que, no dia 12, o grupo HS apresentou valores de migracao significantemente diferentes dos grupos HM (p=O,OO7) e Controle (p=O,O25). No dia 16, os tres grupos foram significantemente diferentes entre si (HS X Controle: p=O,OOl; HM X Controle: p=0,OlO e HS X HM: p=O,OO3). As proliferacoes celulares com IP e com Kl67 nao evidenciaram diferenca significante entre HS, HM e Controle (p=O,819 e p=O,957, respectivamente). As avaliacoes do CD44 e de apoptose tambem nao mostraram diferencas significantes entre os 3 grupos de estudo (p=O,819 para ambos). Conclusoes: O HS exogeno estimula a migracao das celulas epiteliais corneais humanas cultivadas in vitro. Por outro lado, HS nao...(au)
Descrição
Citação
São Paulo: [s.n.], 2000. 111 p. ilustabgraf.