Importância do co-cultivo com fibroblastos de camundongo 3T3 para estabelecer cultura de suspensão de células epiteliais do limbo humano

Página do item simplificado
dc.contributor.authorCristovam, Priscila Cardoso [UNIFESP]
dc.contributor.authorGlória, Maria Aparecida da [UNIFESP]
dc.contributor.authorMelo, Gustavo Barreto de [UNIFESP]
dc.contributor.authorGomes, José Álvaro Pereira [UNIFESP]
dc.contributor.institutionUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.date.accessioned2015-06-14T13:38:44Z
dc.date.available2015-06-14T13:38:44Z
dc.date.issued2008-10-01
dc.description.abstractPURPOSE: To evaluate the importance of the presence of 3T3 fibroblasts for establishing limbal epithelial cultures from cell suspension obtained from corneo-scleral rims (CSR). METHODS: Corneo-scleral rims from different donors (n=6) had their posterior stroma and endothelium stripped away. Each corneo-scleral rim was divided into three equal segments that were set up in tissue culture in three different conditions: one of the segments was placed with the epithelial side up on the bottom of a 6-well culture plate (Group A). The other two fragments were trypsinized and the obtained cell suspension was cultured with (Group B) or without (Group C) irradiaded 3T3 cells. The cells were cultured in supplemental hormonal epithelial medium (SHEM), the epithelial migration and clone formation in groups A, B and C were evaluated with phase contrast microscopy and rodamine B staining. RESULTS: Epithelial cell growth was observed in 4/6 rims (Group A). All epithelial cell suspensions that were cultured with 3T3 cells (Group B) formed clones. No adhesion or true clone formation (holo- or meroclones) was observed in the cell suspensions that were cultivated without 3T3 (Group C) (p=0.009). CONCLUSIONS: Epithelial cell suspension obtained from corneo-scleral rims in this model needs to be cultivated with 3T3 cells in order to form clones and establish limbal epithelial cell colonies with the potential to be used for ocular surface reconstruction.en
dc.description.abstractOBJETIVO: Avaliar a importância da presença de células 3T3 para estabelecer cultura de suspensão de células epiteliais do limbo obtido de rimas córneo-esclerais. MÉTODOS: Rimas de diferentes doadores tiveram seus estroma posterior e endotélio removidos (n=6). Cada rima foi dividida em três segmentos iguais, que foram colocados em cultura em três diferentes condições: um segmento foi colocado na placa de cultura com o lado epitelial para cima (Grupo A). Os dois segmentos restantes foram tripsinizados e a suspensão de células obtida foi cultivada com (Grupo B) ou sem (Grupo C) células 3T3 irradiadas. As células foram mantidas em meio de cultura supplemental hormonal epithelial médium (SHEM), a migração epitelial e a formação de clones nos grupos A, B e C foram avaliadas pela microscopia de contraste de fase e por coloração pela rodamina B. Os resultados foram comparados estatisticamente. RESULTADOS: O crescimento de células epiteliais foi observado em 4/6 rimas (Grupo A). Todas as suspensões de células epiteliais que foram cultivadas com células 3T3 (Grupo B) formaram clones. Nenhuma adesão ou formação de clones verdadeiros (holo ou meroclones) foi observada na cultura de células que foi cultivada sem 3T3 (Grupo C) (p=0,009). CONCLUSÕES: Suspensão de células epiteliais límbicas obtidas de rimas córneo-esclerais no modelo utilizado precisa ser cultivada com células 3T3 para formar clones e estabelecer colônias epiteliais com perspectivas para uso terapêutico na reconstrução da superfície ocular.pt
dc.description.affiliationUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) - UNIFESP Centro Avançado de Superfície Ocular (CASO) Instituto da Visão
dc.description.affiliationUNIFESP Departamento de Oftalmologia
dc.description.affiliationUnifespUNIFESP, Centro Avançado de Superfície Ocular (CASO) Instituto da Visão
dc.description.affiliationUnifespUNIFESP, Depto. de Oftalmologia
dc.description.sourceSciELO
dc.format.extent689-694
dc.identifierhttp://dx.doi.org/10.1590/S0004-27492008000500015
dc.identifier.citationArquivos Brasileiros de Oftalmologia. Conselho Brasileiro de Oftalmologia, v. 71, n. 5, p. 689-694, 2008.
dc.identifier.doi10.1590/S0004-27492008000500015
dc.identifier.fileS0004-27492008000500015.pdf
dc.identifier.issn0004-2749
dc.identifier.scieloS0004-27492008000500015
dc.identifier.urihttp://repositorio.unifesp.br/handle/11600/4570
dc.language.isopor
dc.publisherConselho Brasileiro de Oftalmologia
dc.relation.ispartofArquivos Brasileiros de Oftalmologia
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.subjectEpithelial cellsen
dc.subjectCell culture techniquesen
dc.subjectCell differentiationen
dc.subjectStem cellsen
dc.subjectLimbus corneaeen
dc.subjectCélulas epiteliaispt
dc.subjectTécnicas de cultura de célulaspt
dc.subjectDiferenciação celularpt
dc.subjectCélulas-troncopt
dc.subjectLimbo da córneapt
dc.titleImportância do co-cultivo com fibroblastos de camundongo 3T3 para estabelecer cultura de suspensão de células epiteliais do limbo humanopt
dc.title.alternativeImportance of 3T3 feeder layer to establish epithelial cultures from cell suspension obtained from corneo-scleral rimsen
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/article
Arquivos
Pacote Original
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Imagem de Miniatura
Nome:
S0004-27492008000500015.pdf
Tamanho:
1.1 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Descrição:
Baixar
Coleções
EPM - Artigos