Alterações induzidas por estresse na reatividade adrenérgica em tecido cardíaco de camundongos knockout para adrenoceptor beta-2
Data
2015-08-31
Autores
Moura, Andre Luiz de 
Orientadores
Spadari, Regina Celia
Tipo
Tese de doutorado
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Resumo
Estresse é a resposta do organismo a estímulos aversivos ou situações desconhecidas e sua finalidade evolutiva é permitir a adaptação a tais eventos. No entanto, nem sempre este sistema garante a integridade do organismo. Em átrios de ratos submetidos a estresse ocorrem alterações na resposta às catecolaminas e na expressão de adrenoceptores ?1 (?1-AR) e ?2 (?2-AR). Não se sabe, no entanto, se estas alterações são adaptativas. Este trabalho tem por finalidade investigar: (1) o comportamento do ?1-AR em camundongos KO?2 submetidos a estresse, (2) se o aumento da resposta mediada pelo ?2-AR induzido por estresse é essencial para o processo adaptativo e a sobrevivência e, (3) se ocorrem alterações de expressão de proteínas da cascata de sinalização intracelular nestas condições. Camundongos background (FVB) e knockout para o adrenoceptor ?2 (KO?2) foram distribuídos em grupos controle e submetido ao estresse por choque nas patas. Os átrios direitos e esquerdos foram preparados para estudo das respostas cronotrópica e inotrópica, respectivamente. Curvas concentração-efeito (CCE) à isoprenalina foram obtidas em átrios de camundongos FVB e à isoprenalina, dobutamina e salbutamol em átrios de camundongos KO?2 na ausência e na presença de ICI118,551 (50 nM) ou CGP20712A (300 nM). Nos ventrículos foi avaliada a expressão dos adrenoceptores ?1, ?2 e das enzimas GRK2, GRK5 e ?-ARR2 por técnicas de western blot e de PCR real time. Não houve alteração da frequência de batimentos espontâneos ou da tensão inicial desenvolvida por átrios direitos e esquerdos, respectivamente, entre grupos controle ou submetidos ao estresse na ausência ou presença dos antagonistas, entretanto o CGP20712A reduziu resposta cronotrópica máxima à isoprenalina no grupo FVB controle, cancelou as respostas máximas ao salbutamol e reduziu a resposta à dobutamina em átrios direitos e esquerdos de camundongos KO?2 controle e estresse. O antagonista ICI118,551 reduziu a tensão máxima desenvolvida pelos átrios esquerdos em resposta à isoprenalina nos grupos FVB e KO?2 submetidos a estresse. Átrios direitos e esquerdos de camundongos KO?2 submetidos a estresse foram subsensíveis à isoprenalina. Esta subsensibilidade foi cancelada pelos antagonistas. Não houve alteração de sensibilidade aos demais agonistas. A expressão proteica do adrenoceptor ?1 foi menor em camundongos KO?2 submetidos a estresse, sem alteração na expressão de RNAm para este subtipo de adrenoceptor, na expressão proteica do adrenoceptor ?2 ou das enzimas GRK2 e GRK5. O estresse promoveu redução das expressões proteica e gênica da ?-ARR2. Conclui-se que: (1) o subtipo ?2-AR não é essencial para a sobrevivência dos camundongos ao estresse por choque nas patas; (2) átrios direitos e esquerdos isolados de camundongos KO?2 apresentam um padrão de resposta à isoprenalina diferente de camundongos FVB frente ao estresse; (3) embora tenha sido utilizado tecido ventricular para a determinação da expressão gênica e proteica dos adrenoceptores beta e enzimas da cascata de sinalização intracelular, os resultados encontrados neste tecido são compatíveis com os resultados funcionais apresentados para os átrios direitos e esquerdos; (4) a redução da expressão gênica e proteica da ?-ARR2 pode ser um mecanismo de adaptação do tecido ventricular à excessiva estimulação simpática durante o estímulo estressor.
Descrição
Citação
MOURA, Andre Luiz de. Alterações induzidas por estresse na reatividade adrenérgica em tecido cardíaco de camundongos knockout para adrenoceptor beta-2. 2015. Tese (Doutorado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo, São Paulo, 2015.