Clonagem, sequenciamento, expressão e caracterização parcial da estrutura do Lopap, um ativador de protrombina da lagarta Lonomia obliqua

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dc.contributor.advisorSampaio, Claudio Augusto Machado [UNIFESP]
dc.contributor.authorReis, Cleyson Valença [UNIFESP]
dc.date.accessioned2015-12-06T23:02:37Z
dc.date.available2015-12-06T23:02:37Z
dc.date.issued2002
dc.description.abstractO contato da pele humana com cerdas de lagartas Lonomia obliqua, especie encontrada principalmente na regiao Sul do Brasil, causa, entre outros sintomas, urna severa sindroine hemorragica devido a uma coagulopatia de consumo ocasionada por agentes procoagulantes (ativadores de protrombina e fator X da coagulacao), presentes no veneno. O Lopap (Lonomia obliqua prothrornbin activator protease) e urna proteina de 69 kDa, ativadora de protrotnbina, purificada do extrato bruto das cerdas da taturana L. obliqua atraves de cromatografia de gel filtracao (Sephadex G 75) e fase reversa etn HPLC (coluna C4). A proteina purificada e capaz de ativar a protrombina de forma dose-dependente. Atraves de analise por SDS-PAGE, observou-se que o Lopap pode ser uma molecula composta por 4 cadeias identicas de 18 kD.a A atividade do Lopap e aumentada pela adicao de ions calcio, entretanto outros ions bivalentes, como magnesio ou zinco, nao produzem o mesmo efeito. O Lopap e inibido por imbidores de serino proteases como o PMSF e Trasylol. O peptideo fluorogenico, derivado da protrombina na regiao hidrolisada pela trombina (Abz-YQTFFNPRTGSQ-EDDnp), teve sua clivagem no sitio principal entre a ligacao Arg-Thr. Os parametros cineticos obtidos para este substrato foram: Kmapp de 4,5 pM, kcat de 5,32 seg 1 e wn kcatlKrnaPP1,2 x 106 M-1 s 1. O soro anti-lonomico reconhece o Lopap quando analisado atraves de reacao cruzada por imunodifusao radial O Lopap e capaz de provocar a formacao de trombos, induzir a incoagulabilidade sanguinea, a deplecao do fibrinogenio e causar urna diminuicao na contagem de plaquetas quando injetada na corrente sanguinea de ratos. Tambem foi observada conGestão e hemorragia nos...(au)pt
dc.description.sourceBV UNIFESP: Teses e dissertações
dc.format.extent136 p.
dc.identifier.citationSão Paulo: [s.n.], 2002. 136 p. ilustab.
dc.identifier.fileepm-018309.pdf
dc.identifier.urihttp://repositorio.unifesp.br/handle/11600/18330
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.subjectClonagem molecularpt
dc.subjectProtrombinapt
dc.subjectMariposaspt
dc.subjectCoagulação sanguíneapt
dc.titleClonagem, sequenciamento, expressão e caracterização parcial da estrutura do Lopap, um ativador de protrombina da lagarta Lonomia obliquapt
dc.title.alternativeCloning, sequencing, expression and partial structure characterization of Lopap, a prothrombin activator from Lonomia obliqua caterpillaren
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis
unifesp.campusSão Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)pt
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