Unifesp - Em verificação

URI Permanente desta comunidade

https://hdl.handle.net/11600/100

Navegar

Navegando Unifesp - Em verificação por Orientador(es) "Han, Sang Won [UNIFESP]"

Agora exibindo 1 - 1 de 1
  • Nenhuma Miniatura disponível
    Item
    Acesso aberto (Open Access)
    Avaliação da expressão genica ativada pelo gene GM-CSF em linhagens celulares de fibroblasto, mioblasto, macrófago e endotelial
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2014) Santos, Adara Aurea dos [UNIFESP]; Han, Sang Won [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/0069955147703693; http://lattes.cnpq.br/5729369037027507
    A lesão muscular ocorre frequentemente entre os esportistas e a principal responsável pelo abandono de suas atividades. A reparação do tecido muscular lesado e um processo complexo e lento, que em muitos casos, a reparação tecidual e incompleta devido a fibrose exacerbada. O GM-CSF e um fator liotrópico hematopoiético responsável pela proliferação e diferenciação de granulocitos e monocitos, e mobilizacao de celulas-tronco da medula ossea. Diversos grupos demonstraram que o GM-CSF possui acao arteriogenica e vasculogenica em modelo murino de isquemia de membros e foi demonstrado que o uso deste fator levou a diminuicao de fibrose. Com base destas observacoes, foi proposto que o GM-CSF atue como o principal fator no processo reparativo do tecido muscular lesado. Para validar esta hipótese, o principal objetivo deste trabalho foi avaliar as alterações de expressão genica das células que compõem o tecido muscular esquelético pós-transfecção do gene GM-CSF. Para isso, as linhagens celulares C2C12 (mioblasto), NIH3T3 (fibroblasto), Raw 264.7 (macrofago) e tEnd (celula endotelial) foram transfectadas por eletroporação ao ou nucleofecção com o vetor uP-mGM-CSF, que expressa GM-CSF murino, e nos tempos 8, 24, 48 e 72 horas o RNA total foi obtido para análise de transcrição por PCR array, o qual foi customizado para conter genes pertencentes a angiogenese, miogenese e fibrogenese e alguns fatores relevantes foram analisados por ELISA ou Western blotting. O conjunto de resultados obtidos com as quatro linhagens celulares mostra que o GM-CSF possui acao direta em macrofagos, como era esperado, mas também em células de origem não hematopoieticas. A principal prova disso e a expressão das duas subunidades do receptor do GM-CSF, e a alteração do perfil de genes analisados ao longo de 72 horas pos-transfecção. Estes resultados também sugerem que os três processos fundamentais para o reparo de musculo esquelético lesionado, angiogenese, miogenese e fibrogenese, são regulados pelo GM-CSF. Sendo assim, estes resultados corroboram com a proposta do nosso grupo de que o GM-CSF e um fator essencial na reparação do musculo esquelético.