Navegando por Palavras-chave "Epithelial cells"

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    Acesso aberto (Open Access)
    Avaliação da presença de células caliciformes na córnea humana
    (Conselho Brasileiro de Oftalmologia, 2004-02-01) Barros, Jeison de Nadai [UNIFESP]; Mascaro, Vera Lucia Degaspare [UNIFESP]; Gomes, José Álvaro Pereira [UNIFESP]; Sousa, Luciene Barbosa de [UNIFESP]; Hofling-Lima, Ana Luisa [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP); FMO I.A.M.S.P.E Hospital do Servidor Público Estadual
    PURPOSE: To analyze by impression cytology the presence of goblet cells on corneal surfaces with conjunctivalization. METHODS: Corneal-conjunctival impression cytology was performed in 65 eyes of 65 patients who had clinical signs of conjunctivalization with or without previous ocular surgery. Patients were classified into two groups according to previous history of ocular surface reconstructive surgery associated with limbal transplantation and human amniotic membrane. In group I, 49 patients without previous ocular surgery were evaluated and in group II 16 patients were included after ocular surface reconstructive surgery with conjunctivalization recurrence. Samples were obtained in the affected eye between February 2000 and February 2002 at the UNIFESP's External Eye Disease Laboratory. Limbal deficiency was detected when one or more goblets cells were found on the corneal surface. RESULTS: In group I one or more goblet cells were found on the corneal surface of 21 eyes (42.85%). In group II goblet cells were found on the corneal surface of 9 patients (56.25%). CONCLUSION: Presence of goblet cells on the corneal surface detected by impression cytology in patients with conjunctivalization can confirm limbal stem cell deficiency, however, its absence does not exclude the diagnosis.
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    Comparação entre membrana amniótica com e sem epitélio como substrato para cultura de células epiteliais do limbo ex vivo
    (Conselho Brasileiro de Oftalmologia, 2011-04-01) Covre, Joyce Luciana [UNIFESP]; Loureiro, Renata Ruoco [UNIFESP]; Cristovam, Priscila Cardoso [UNIFESP]; Ricardo, José Reinaldo da Silva [UNIFESP]; Freymüller-Haapalainen, Edna [UNIFESP]; Gomes, José Álvaro Pereira [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    PURPOSE: To evaluate the efficacy and ultrastructural aspects of human limbal epithelial cells cultured on amniotic membrane (AM) with and without epithelium. METHODS: Limbal epithelial cell cultures were established from cadaveric cor neo-scleral rim explants derived from 6 different donors. The explants from each donor were placed under 3 different groups: on human preserved AM with epithelium (Group 1), AM deepithelialized with trypsin (Group 2) and control (Group 3). The epithelial cell migration was evaluated under phase contrast microscopy. After 15 days, the amniotic membrane with cells cultures were removed and submitted to scanning and transmission electron microscopy to check for epithelial migration and adhesion. RESULTS: All epithelial cell cultures from the controls grew over the botton of the culture plate wells until reaching confluence. Epithelial cultures grew over all but one denuded amniotic membrane. In the group amniotic membrane with epithelium, epithelial cell growing was observed only in 1 well. CONCLUSIONS: Using this model, denuded amniotic membrane appeared to be the best substrate for epithelial cell migration and adhesion comparing to amniotic membrane with epithelium. Removal of amniotic membrane epithelial seems to be an important step for establishing limbal epithelial cell culture on amniotic membrane.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Cytological features of live limbal tissue donor eyes for autograft or allograft limbal stem cell transplantation
    (Conselho Brasileiro de Oftalmologia, 2011-08-01) Barros, Jeison de Nadai [UNIFESP]; Santos, Myrna Serapião dos [UNIFESP]; Barreiro, Telma Regina Maria Pereira [UNIFESP]; Belfort, Rubens Junior [UNIFESP]; Gomes, José Álvaro Pereira [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    PURPOSE: To evaluate by impression cytology (IC) the corneal surface of live limbal tissue donor eyes for autograft or allograft limbal stem cell transplantation (LSCT). METHODS: Twenty limbal donors were enrolled (17 for autograft LSCT and 3 for allograft). Impression cytology was performed before transplantation of superior and inferior limbal grafts and after the third postoperative month. RESULTS: Impression cytology analysis showed sheets of corneal epithelial cells and goblet cell absence beyond the edge of the keratectomy sites in all patients, suggesting that conjunctival invasion towards the center did not occur in any eye. Partial conjunctivalization within 2 to 3 clock hours, confirmed by the presence of goblet cells, was limited to the keratectomy site in 10% of the cases. CONCLUSION: A clear central corneal surface was demonstrated in all eyes following surgery leading to the conclusion that limbal donation was a safe procedure in this group of patients. A small percentage of eyes can have donor sites re-epithelized with conjunctival cells at the periphery of the cornea.
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    Efeitos da ativação dos receptores estrogênicos na expressão e na localização de N-caderina em células de câncer prostático independentes de andrógenos
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-07-31) Silva, Rafael de Souza [UNIFESP]; Porto, Catarina Segreti [UNIFESP]; Lombardi, Ana Paola Giometti [UNIFESP]; Vicente, Carolina Meloni [UNIFESP]; Ana Paola Giometti Lombardi: http://lattes.cnpq.br/3012202070649059; Carolina Meloni Vicente: http://lattes.cnpq.br/2222473909041643; http://lattes.cnpq.br/6262412968631187; http://lattes.cnpq.br/9064114811735332; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Andrógenos, estrógenos e as interações estroma-epitélio estão envolvidos no desenvolvimento do câncer prostático. Apesar da maioria dos cânceres prostáticos depender de andrógenos para o crescimento nos estágios iniciais e ser responsiva à terapia de ablação androgênica, em muitos casos o tumor progride para um fenótipo independente de andrógeno ou também denominado resistente à castração (CRPC), que tende a progredir e levar à metástase e contra o qual não há uma terapia efetiva. Os mecanismos envolvidos no desenvolvimento do CRPC não estão esclarecidos. Estudo do nosso laboratório mostrou a expressão dos receptores estrogênicos ESR1 (ERα) e ESR2 (ERβ) nas células PC-3, usada como modelo de CRPC. Além disso, os estrógenos desempenham um papel na proliferação das células PC-3 por meio de uma nova via de sinalização envolvendo a ativação de β-catenina mediada pelo ESR2. N-caderina está conectada via α-catenina e β-catenina ao citoesqueleto e funciona como um componente da adesão celular e como molécula sinalizadora. N-caderina tem surgido como um importante alvo terapêutico e está envolvida na regulação da proliferação, sobrevivência, invasão e metástase de células cancerígenas. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar os efeitos da ativação dos receptores estrogênicos na expressão e na localização de N-caderina nas células de câncer prostático independentes de andrógenos. O presente estudo utilizou as linhagens de célula de câncer prostático independente de andrógenos PC-3 (células de metástase óssea de adenocarcinoma prostático grau IV) e DU-145 (células de metástase cerebral de carcinoma prostático) e de células epiteliais de próstata (PNT1A), obtida de um homem pós-puberdade e imortalizadas com SV40. As células foram incubadas na ausência (controle) ou na presença de 17-β-estradiol (E2), agonista seletivo do ESR1 (PPT) ou agonista seletivo do ESR2 (DPN) (10 nM) por 10 e 30 minutos, e 1, 2, 24 and 48 horas. Em outros experimentos, as células foram pré-incubadas ou não com o antagonista seletivo do ESR2 (PHTPP, 10 nM) por 30 minutos e, então, incubadas com o agonista seletivo do ESR2 (DPN 10 nM) por 24 horas. Ensaios de Western blot e imunofluorescência para a detecção de N-caderina foram realizados nas células PC-3, DU-145 e PNT1A A N-caderina foi detectada preferencialmente na membrana plasmática das células PNT1A, sugerindo o envolvimento desta proteína na adesão célula-célula. A expressão de N-caderina foi maior as células PC-3 (células altamente metastáticas) do que nas células DU-145. Imunomarcação para esta proteína foi detectada preferencialmente no citoplasma destas células, sugerindo alterações no processo de exocitose, endocitose e/ou reciclagem desta proteína e o rompimento do complexo de adesão. O tratamento das células PC-3 com o 17β-estradiol (E2) ou com o agonista seletivo do ESR1 (PPT) não afetou a expressão de N-caderina. Por outro lado, o agonista seletivo do ESR2 (DPN) induziu diminuição da expressão de N-caderina nas células PC-3. Este efeito foi bloqueado pelo pré-tratamento com o antagonista seletivo do ESR2 (PHTPP), indicando o envolvimento do ESR2 na regulação da expressão da N-caderina. A ativação do ESR1 ou do ESR2 não alterou a expressão e a localização da N-caderina nas células PNT1A e DU-145. Nossos resultados, em conjunto com os obtidos anteriormente no nosso laboratório, indicam que a ativação do ESR2 diminuiu a expressão de N-caderina liberando a β-catenina para o citoplasma. A β-catenina pode regular a transcrição de genes alvos envolvidos com a proliferação e, provavelmente, com a migração e a invasão celular. Em conclusão, nossos resultados mostraram uma expressão diferencial da N-caderina em células de câncer prostático independentes de andrógenos e uma localização preferencialmente citoplasmática, sugerindo alterações no processo de exocitose, endocitose e/ou reciclagem desta proteína. Além disso, a ativação dos receptores estrogênicos ESR2, mas não do ESR1, levou à diminuição da expressão da N-caderina. Com a redução dos níveis de N-caderina, há a liberação de β-catenina para o citoplasma, sua translocação para o núcleo e ativação gênica. A identificação de novas vias de sinalização intracelulares poderá ter importância no desenvolvimento de alvos terapêuticos para o tratamento do CRPC.
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    Importância do co-cultivo com fibroblastos de camundongo 3T3 para estabelecer cultura de suspensão de células epiteliais do limbo humano
    (Conselho Brasileiro de Oftalmologia, 2008-10-01) Cristovam, Priscila Cardoso [UNIFESP]; Glória, Maria Aparecida da [UNIFESP]; Melo, Gustavo Barreto de [UNIFESP]; Gomes, José Álvaro Pereira [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    PURPOSE: To evaluate the importance of the presence of 3T3 fibroblasts for establishing limbal epithelial cultures from cell suspension obtained from corneo-scleral rims (CSR). METHODS: Corneo-scleral rims from different donors (n=6) had their posterior stroma and endothelium stripped away. Each corneo-scleral rim was divided into three equal segments that were set up in tissue culture in three different conditions: one of the segments was placed with the epithelial side up on the bottom of a 6-well culture plate (Group A). The other two fragments were trypsinized and the obtained cell suspension was cultured with (Group B) or without (Group C) irradiaded 3T3 cells. The cells were cultured in supplemental hormonal epithelial medium (SHEM), the epithelial migration and clone formation in groups A, B and C were evaluated with phase contrast microscopy and rodamine B staining. RESULTS: Epithelial cell growth was observed in 4/6 rims (Group A). All epithelial cell suspensions that were cultured with 3T3 cells (Group B) formed clones. No adhesion or true clone formation (holo- or meroclones) was observed in the cell suspensions that were cultivated without 3T3 (Group C) (p=0.009). CONCLUSIONS: Epithelial cell suspension obtained from corneo-scleral rims in this model needs to be cultivated with 3T3 cells in order to form clones and establish limbal epithelial cell colonies with the potential to be used for ocular surface reconstruction.
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    Paracoccidioides brasiliensis induces secretion of IL-6 and IL-8 by lung epithelial cells. Modulation of host cytokine levels by fungal proteases
    (Elsevier B.V., 2012-10-01) Maza, Paloma Korehisa [UNIFESP]; Oliveira, Priscila de [UNIFESP]; Toledo, Marcos Sergio de [UNIFESP]; De Paula, Daisy Maria Bentes [UNIFESP]; Takahashi, Helio Kiyoshi [UNIFESP]; Straus, Anita Hilda [UNIFESP]; Suzuki, Erika [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Paracoccidioides brasiliensis is a pathogenic, dimorphic fungus that causes paracoccidioidomycosis, a systemic human mycosis that is highly prevalent in Latin America. in this study, we demonstrated that P. brasiliensis yeasts induced interleukin (IL)-8 and IL-6 secretion by human lung epithelial A549 cells. However, tumor necrosis factor-alpha and interferon-gamma were undetectable in these cultures. Moreover, P brasiliensis yeasts induced activation of p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK), c-Jun NH2-terminal kinase (JNK) and extracellular signal-regulated kinase (ERK) 1/2 in A549 cells, and IL-8 and IL-6 secretion promoted by this fungus was dependent on activation of p38 MAPK and ERK 1/2. in addition, IL-8 and IL-6 levels were significantly higher in culture supernatants of A549 cells that were incubated with formaldehyde-fixed P brasiliensis compared to cultures of cells that were infected with live yeasts. Our results indicate that. the observed cytokine level differences were due to protease expression, in live yeasts, that degraded these cytokines. Degradation of human recombinant IL-8 and IL-6 by live P brasiliensis was inhibited by AEBSF and aprotinin, suggesting that these proteases belong to a family of serine proteases. This is the first report showing that P brasiliensis may modulate host inflammation by expressing proteases that degrade proinflammatory cytokines. (C) 2012 Institut Pasteur. Published by Elsevier Masson SAS. All rights reserved.