Navegando por Palavras-chave "Microscopia eletrônica de transmissão"

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    Análise morfológica, ultraestrutural e molecular de mixozoários (Cnidaria) parasitos de Pimelodina flavipinnis (Siluriformes: Pimelodidae) da bacia Amazônica
    (Universidade Federal de São Paulo, 2021-10-27) Araújo, Bruno de Lima [UNIFESP]; Naldoni, Juliana [UNIFESP]; Adriano, Edson Aparecido [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/6376573741747319; http://lattes.cnpq.br/5851992242157875; http://lattes.cnpq.br/1070573250777498
    A bacia Amazônica é a maior bacia hidrográfica da América do Sul. Composta por uma rica ictiofauna, um de seus principais grupos de peixes são os da família Pimelodidae, sendo a espécie Pimelodina flavipinnis comumente encontrada. A ictiofauna amazônica é acometida por diversos patógenos, como aqueles da classe Myxozoa, cnidários endoparasitos que vêm recebendo grande destaque científico nos últimos anos. Através deste estudo, foi registrado, pela primeira vez, uma espécie de Ceratomyxa infectando a vesícula biliar de Pimelodina flavipinnis. Foram examinados doze exemplares desse peixe coletados no rio Solimões, sendo que sete (58%) estavam infectados. A medição dos mixosporos demonstrou média de 4,6 ± 0,5 (3,4 – 5,5) μm de comprimento, 31,2 ± 2,3 (26,2 – 36,3) μm de espessura e 162 ± 10,4 (143 – 178) ° de ângulo posterior. As cápsulas polares apresentaram 1,8 ± 0,3 (1,0 – 2,5) μm de comprimento e 1,9 ± 0,3 (1,2 – 2,4) μm de largura. A análise ultraestrutural revelou a presença de mitocôndrias alongadas distribuídas próximo a parede do plasmódio, diferentes estágios de desenvolvimento de mixosporos no interior do plasmódio, mixosporos com esporoplasma binucleado e filamento polar com 3 a 4 voltas no interior da cápsula polar. A partir de buscas feitas no BLASTn, com a sequência da menor unidade ribossomal do DNA (small subunit ribosomal DNA – ssrDNA), foi observado que a sequência obtida da espécie parasito da vesícula biliar de P. flavipinnis não corresponde a nenhuma outra disponível no GenBank, sendo Ceratomyxa gracillima e Ceratomyxa vermiformis as espécies com maior identidade, com 94% e 93% de similaridade respectivamente. A análise filogenética demonstrou que essa espécie agrupa em um subclado de espécies de Ceratomyxa de peixes amazônicos, e apresenta-se como espécie irmã de C. gracillima, que também infecta um peixe da família Pimelodidae. As análises morfológicas, ultraestruturais e moleculares demonstram que a espécie de Ceratomyxa infectando P. flavipinnis é uma espécie ainda não descrita na literatura.
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    Avaliação de métodos de fixação do sistema nervoso central do rato: estudo de banco de tecidos
    (Universidade Federal de São Paulo, 2021-11-26) Toledo, Cristiane Vitor de Andrade [UNIFESP]; Sinigaglia, Rita de Cássia [UNIFESP]; Borges, Andréa Aurélio [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/2847497386085924; http://lattes.cnpq.br/2430198418696777; http://lattes.cnpq.br/7899579832673959
    Objetivo: O objetivo deste trabalho foi avaliar ultraestruturalmente a qualidade da fixação do sistema nervoso central de ratos Wistar machos normais por meio das técnicas de perfusão transcardíaca com infusão por bomba peristáltica (volume), coluna d’água (pressão hidrostática) e imersão. Métodos: Foram utilizadas amostras de hipocampo dorsal e córtex parietal oriundos de um banco de tecidos. Os blocos foram processados e incluídos em resina epoxy para avaliação ultraestrutural através da análise ao microscópio eletrônico de transmissão. Resultados: A análise ultraestrutural revelou que o método de fixação por imersão compromete severamente a estrutura celular das duas regiões analisadas, produzindo sinais de autólise. Os animais cuja fixação foi realizada por meio de perfusão transcardíaca com bomba peristáltica (pressão) ajustada para o débito cardíaco ou coluna d’água (pressão hidrostática) com pressão fisiológica apresentaram ultraestrutura bem preservada, com discreta superioridade no grupo perfundido por coluna d’água. Por outro lado, os animais fixados por perfusão transcardíaca com infusão por bomba peristáltica e volume aumentado ou por método de coluna d ́água com pressão aumentada apresentaram sinais de alteração da ultraestrutura celular e das bainhas de mielina, em especial nos animais perfundidos pelo método de coluna d’água. Conclusões: O método de fixação por imersão produziu alterações ultraestruturais típicas de autólise. A fixação por perfusão transcardíaca com infusão por bomba peristáltica ou por coluna d’água, desde que respeitadas as condições fisiológicas ideais proporcionou uma boa qualidade de preservação do tecido nervoso de ratos, em contrapartida à qualidade severamente comprometida do tecido nervoso fixado por meio de perfusão transcardíaca nos dois métodos empregados sem a devida atenção aos parâmetros fisiológicos.
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    Pathophysiology of enteroaggregative Escherichia coli infection: an experimental model utilizing transmission electron microscopy
    (Instituto Brasileiro de Estudos e Pesquisas de Gastroenterologia - IBEPEGE Colégio Brasileiro de Cirurgia Digestiva - CBCD Sociedade Brasileira de Motilidade Digestiva - SBMD Federação Brasileira de Gastroenterologia - FBGSociedade Brasileira de Hepatologia - SBHSociedade Brasileira de Endoscopia Digestiva - SOBED, 2010-09-01) Andrade, Jacy Alves Braga de [UNIFESP]; Freymüller-Haapalainen, Edna [UNIFESP]; Fagundes-Neto, Ulysses; Division of Pediatric Gastroenterology; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    CONTEXT: Enteroaggregative Escherichia coli strains have been associated with persistent diarrhea in several developing countries. In vivo procedures with animal models as rat, rabbit and gnotobiotic piglets intestinal loops, in vitro assays with cellular lines like T84, Caco 2, HT29, HeLa e HEp-2 and in vitro organ culture with intestinal fragments have been applied to study these bacteria and their pathogenicity. OBJECTIVES: The present experimental research assessed the pathogenic interactions of three enteroaggregative Escherichia coli strains, using the in vitro organ culture, in order to observe and compare alterations in different regions of both, the ileal and the colonic mucosa. METHODS: This study applied intestinal fragments from terminal ileum and colon that were excised from pediatric and adult patients that underwent colonoscopic procedures. Tissue was fixed for transmission electron microscopic study. Each bacterium was tested with three intestinal fragments for each region. RESULTS: Enteroaggregative Escherichia coli strains colonized and provoked citotoxic effects in the ileal and colonic mucosa. Total or partial villi destruction, vacuolization of basal cytoplasm of the enterocytes, epithelium detachment, derangement of the structure and epithelial cell extrusion in ileal mucosa could explain the perpetuation of the diarrhea. Bacterial aggregates were seen in intestinal lumen associated with mucus and cellular debris and in the intercellular spaces of the destroyed epithelium, suggesting bacterial invasion that seemed to be secondary to the destruction of the tissue. CONCLUSIONS: Pathogenesis of persistent diarrhea should include alterations in the small bowel structures where the digestive-absorptive functions take place. In the colonic mucosa the inflammatory lesions could explain the occurrence of colitis.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Respostas celulares do fígado e do músculo esquelético distante da lesão térmica corporal em ratos wistar jovens
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2014-03-26) Bortolin, Jeferson André [UNIFESP]; De Oliveira, Flavia [UNIFESP]; Ribeiro, Daniel Araki [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/9969803499258672; http://lattes.cnpq.br/3387760393535776; http://lattes.cnpq.br/3445335633603961; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Introduction: Thermal Injuries represent a public health problem and is a major cause of accidents in children and adolescents. The most obvious feature of thermal injuries corresponds to extensive tissue destruction, leading to activation of catabolic processes in the body. Purpose: The aim of this study is to understand the cellular mechanisms related to the systemic effects of thermal scald injury in the liver and skeletal muscle distant from the injury. Methods: 42 young rats were used equally divided into the following groups: control (CTRL) and scalding burn injury (SBI). SBI is 45% of the body surface and euthanasia of the animals occurred at 1, 4 and 14 days after injury. After this period has been removed the middle part of the medial gastrocnemius muscle and liver fragment. The liver samples were subjected to histological analysis (hematoxylin & eosin and Sirius red), immunohistochemistry of inflammatory mediator cyclooxygenase-2 (COX-2), Polymerase Chain Reaction in Real Time (qPCR) of the inflammatory mediators tumor necrosis factor alpha (TNF-α), nitric oxide synthase (iNOS), COX-2 and cell apoptosis effector caspase-3. Have samples of skeletal muscle were subjected to ultrastructural analysis by transmission electron microscopy (TEM). Results: Histopathology showed change in radial alignment of hepatocytes in relation to the vessel, increased sinusoidal space and size disuniform hepatocyte morphology of the liver in animals subjected to SBI. The identification of collagen staining with Sirius Red (SR) has been demonstrated focal accumulation of connective tissue (collagen type III) in the liver 14 days after the SBI. Immunohistochemical labeling for COX-2 was evidenced focal immunoblots in the livers of animals with SBI and decreasing with the experimental days. Analysis of qPCR for inflammatory mediators (TNF-α, COX-2 and iNOS) and the effector of apoptosis, caspase-3, there was no significant difference between groups. Regarding the ultrastructural analysis of the striated skeletal muscle was evidenced accumulation of lipid bodies (related to inflammation) and degeneration of myofibrils with fragmentation of Z lines in animals that underwent SBI. Regarding quantitative results evidenced a decrease in body mass and an increase in the area of the hepatocytes of animals with 14 after SBI. In mononuclear cell density of hepatocytes and sinusoidal cells binucleate significant difference in the groups and the time of the experiment and compared to gene expression of proteins there were no significant changes between groups. Conclusion: We conclude that the body thermal injury to great extent has systemic effects, triggering the activation of cellular responses such as: changes in structural morphology of liver tissue, ultrastructural changes in skeletal muscle morphology, inflammation of the liver tissue and accumulation of tissue connective liver and skeletal muscle far from the lesion. With the understanding of the mechanisms investigated, this work may contribute to the establishment of effective rehabilitation strategies in large burns.