Navegando por Palavras-chave "Movimento celular"
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- ItemAcesso aberto (Open Access)Bloqueio da migração de células-tronco neurais por condroitim sulfato via ativação de ROCK(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2015-04-29) Galindo, Layla Testa [UNIFESP]; Porcionatto, Marimelia Aparecida [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/6155537170968904; http://lattes.cnpq.br/5977155628700783; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)A neurogênese é um evento importante no sistema nervoso central em desenvolvimento e no adulto, e é caracterizada pela geração de novos neurônios a partir de células-tronco neurais (CTN) localizadas pricipalmente na zona subventricular e no hipocampo. Uma lesão altera o padrão normal da neurogênese e sinais quimioatrativos estimulam a migração de neuroblastos dos nichos neurogênicos para o local lesado, onde há a formação da cicatriz glial e produção de moléculas inibitórias do crescimento axonal, entre elas, proteoglicanos de condroitim sulfato. A sinalização desencadeada por fatores solúveis e por componentes da matriz ativa membros da família das RhoGTPases, que desempenham funções essenciais no processo de migração celular. Nossa hipótese é que componentes da matriz regulam diferentemente a migração de neuroblastos por alterações na dinâmica de adesão celular e na atividade de RhoGTPases. Utilizando modelo de lesão traumática no córtex motor do camundongo adulto observamos que os neuroblastos que migraram para o local lesado não foram capazes de penetrar na região, rica em proteoglicanos de condroitim sulfato. Em seguida, avaliamos a migração in vitro utilizando CTN cultivadas como neuroesferas. Observamos que o condroitim sulfato (CS) exerceu uma ação inibitória sobre a migração das CTN, diminuindo a velocidade inicial de migração e alterando a dinâmica de protrusão. Além disso, CS promoveu aumento no tamanho das adesões formadas durante a protrusão e dificultando o espraiamento das CTN. Porém, a inibição de ROCK estimulou a migração das CTN tanto em superfícies recobertas por laminina quanto por CS e reverteu alguns de seus efeitos inibitórios, como a retomada da capacidade de espraiamento celular, e a diminuição do tamanho das adesões. Finalmente, a inibição do receptor de Nogo (NgR1), reverteu o efeito inibitório de CS sobre a migração das CTN in vitro. Concluímos, assim, que a inibição da migração de CTN provocada por CS se dá pela ativação de ROCK via ativação de NgR1.
- ItemSomente MetadadadosEfeito do hialuronato de sódio na migração e proliferação do epitélio de córnea humana.(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2000) Gomes, José Álvaro Pereira [UNIFESP]; Campos, Mauro Silveira de Queiroz [UNIFESP]Introdução: O hialuronato de sódio (HS) e um constituinte da matriz extracelular, que parece estimular a migração, adesão e proliferação epitelial corneal em coelhos. No entanto, controversias ainda persistem sobre os mecanismos da acao do HS nestas funcoes. Objetivos: Avaliar o efeito do HS exogeno na migracao e proliferacao das celulas epiteliais corneais humanas cultivadas in vitro; avaliar se a presenca do HS exogeno altera a expressao do receptor do HS, CD44, nessas celulas e avaliar inducao de apoptose celular pelo HS. Material e Metodos: Tres culturas de celulas epiteliais (n=l7) de diferentes corneas humanas foram selecionadas e separadas aleatoriamente para receber: 1. meio de cultura com HS diluido a O,6mg/ml; 2. meio enriquecido com hidroxipropilmetilcelulose (HM) 2,5mg/ml para obter viscosidade semelhante a do HS utilizado e 3. apenas meio de cultura (Controle). As culturas foram avaliadas por microscopia invertida por um observador mascarado. Medidas de area de crescimento foram obtidas para determinar migracao epitelial nos dias 4, 8, 12 e 16. Repetiu-se o primeiro experimento e, ao final do 16§ dia, celulas epiteliais dos grupos HS, HM e Controle de corneas diferentes (n=5) foram suspensas e enviadas para avaliacao de proliferacao por citometria de fluxo, pelo uso de iodeto de propidium (IP) e por imunohistoquimica, utilizando-se o anticorpo Ki-67 (n=6); avaliacao imunohistoquimica para deteccao de CD44 (n=5) e teste de apoptose, utilizando o corante Hoechst (n=6). As comparacoes entre os 3 grupos de estudo foram realizadas pela ANOVA para medidas repetidas para migracao e teste de Friedman pa ra proliferacao por IP e Ki-67, receptor CD44 e apoptose. Resultados: A analise da area de migracao epitelial das culturas dos grupos HS, HM e Controle mostrou que, no dia 12, o grupo HS apresentou valores de migracao significantemente diferentes dos grupos HM (p=O,OO7) e Controle (p=O,O25). No dia 16, os tres grupos foram significantemente diferentes entre si (HS X Controle: p=O,OOl; HM X Controle: p=0,OlO e HS X HM: p=O,OO3). As proliferacoes celulares com IP e com Kl67 nao evidenciaram diferenca significante entre HS, HM e Controle (p=O,819 e p=O,957, respectivamente). As avaliacoes do CD44 e de apoptose tambem nao mostraram diferencas significantes entre os 3 grupos de estudo (p=O,819 para ambos). Conclusoes: O HS exogeno estimula a migracao das celulas epiteliais corneais humanas cultivadas in vitro. Por outro lado, HS nao...(au)
- ItemAcesso aberto (Open Access)Estudo do papel do óxido nítrico na ativação da GTPase Rac1 em células endoteliais e de melanoma murino(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2015-11-25) Borges, Roberta Eller [UNIFESP]; Monteiro, Hugo Pequeno [UNIFESP]; Batista, Wagner Luiz [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/4373797404389169; http://lattes.cnpq.br/6154759166234850; http://lattes.cnpq.br/1300439181330301; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)As proteínas Rac pertencem à família Rho-GTPases que controlam uma ampla variedade de processos celulares como, por exemplo, a formação de fibras de estresse e de adesão focal, a diferenciação celular, migração celular e apoptose. Elas atuam como chaves moleculares, e quando ativadas se encontram associadas ao nucleotídeo GTP e nesta conformação interagem com outras proteínas sinalizadoras participando ativamente dos processos de transdução de sinais originários de vários estímulos extracelulares. Muitos estudos mostraram que a família Rho-GTPases desempenha um papel importante em processos como a migração celular e produção de espécies reativas de oxigênio (ERO). Além disso, também é conhecido que a GTPase Rac-l, está envolvida na migração de células endoteliais associada a angiogênese com as ERO promovendo estes eventos (L. Moldovan et ai, 2006). A GTPase Rac-l também participa na migração de células tumorais relacionada a processos de invasão e de metástase. Entretanto, pouco se sabe sobre o papel do óxido nítrico (NO) nestes processos. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a participação do NO na regulação da atividade de Rac-l emcélulas endoteliais de aorta de coelho (RAEC), bem como em modelo de melanoma murino. Inicialmente foi observado que tanto NO derivado de estimulação por bradicinina (BK) como o S-nitrosotiol nitrosoglutationa (GSNO) foram capazes de ativar Rac-l em células RAEC. Este processo levou a igração das células e mostrou-se dependente da S-nitrosilação de Ras, com participação de PI3K. Nas células tumorais B16FIO, foram isoladas duas sublinhagens com capacidades metastáticas polares, sendo a sublinhagem Nex8H (células metastáticas), e a sublinhagem NexlOC (mimetiza tumor primário). Observamos que a ativação de Rac- 1 está envolvida na inibição da migração e invasão celular do melanoma murino metastático Nex8H, quando a produção endógena de NO foi inibida. Curiosamente, o 1 resultado inverso foi observado em células NexlOC (não metastáticas). Esses resultados mostram que a GTPase Rac-I desempenha papéis antagônicos frente a um mesmo estímulo dependendo do estágio de desenvolvimento em que se encontra a célula tumoral, e os mesmos pcidem contribuir para melhor compreender os mecanismos que envolvem a relação entre NO, Rac-I e processos de invasão e migração celular.
- ItemSomente MetadadadosMucopolissacarídeos ácidos e mucopolissacaridases na histogênese: possível função nos processos de migração, diferenciação e crescimento celular(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1980) Sampaio, Lucia de Oliveira [UNIFESP]; Dietrich, Carl Peter Von [UNIFESP]