Mapeamento e caracterização do RNAm dos genes do sistema renina-angiotensina ao longo do nefrón de rato
Data
1999
Autores
Aneas, Ivy 
Orientadores
Pesquero, Joao Bosco
Tipo
Dissertação de mestrado
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Resumo
O sistema renina-angiotensina (SRA) corresponde a um complexo sistema hormonal que desempenha importante papel no controle da homeostasia cardiovascular. Com a Introdução das tecnicas de biologia molecular, esta visao classica do SRA (sistema endocrino) vem sendo modificada, de forma a incluir funcoes tanto paracrinas como autocrinas da Ang II e alguns de seus metabolitos produzidos localmente em varios tecidos. A identificacao de todos ou parte dos componentes do SRA em diferentes celulas e tecidos constitui um passo importante para a compreensao deste sistema. No presente estudo, desenvolvemos a tecnica de RT-PCR para mapear a expressao do RNAm dos genes da renina, do angiotensinogenio e da ECA ao longo do nefron de rato. RNA total glomerular e tubular foram isolados. A quantificacao da expressao dos componentes do SRA no rim (cortex, medula externa e interna) foi determinada por RNase Protection Assay (RPA). A b-actina foi utilizada como controle positivo nas reacoes de RT-PCR e para normalizar os resultados obtidos por RPA. A especificidade dos produtos de PCR foi demonstrada por Southern blotting. RNAm para angiotensinogenio, renina e ECA foram detectados, por RT-PCR, em cortex, medula externa e interna. Ao longo do nefron, produtos de amplificacao especificos para angiotensinogenio (335 pb) e renina (25 8 pb) foram detectados em glomerulo, porcoes Sl e S2-S3 do tubulo proximal e ducto coletor (cortical, medular externo e interno). Nao foi detectada a expressao do RNAm destes genes nas porcoes fina e ascendente espessa (cortical e medular) da alca de Henle. A ECA (384 pb) apresentou distribuicao semelhante aos outros dois genes, exceto na porcao S2-S3 do tubulo proximal, onde o RNAm nao foi detectado. A quantificacao por RPA demonstrou que a expressao do angiotensinogenio e similar no cortex e na medula, enquanto que a renina e expressa principalmente no cortex renal. A ECA, por sua vez, apresenta expressao significativamente maior na medula externa quando comparada ao cortex e a medula interna. Os resultados indicam que, embora os genes do SRA estejam amplamente distribuidos no tecido renal, eles apresentam uma distribuicao diferenciada ao longo do nefron e compartimentos intrarenais de rato
Descrição
Citação
São Paulo: [s.n.], 1999. 88 p. ilus.