Análise dos perfis proteômico e lipidômico de líquido folicular de pacientes com endometriose e endometrioma submetidas ao tratamento de fertilização in vitro
Data
2013-05-14
Autores
Regiani, Thais 
Orientadores
Lo Turco, Edson Guimaraes
Tipo
Tese de doutorado
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Resumo
Objetivo: Determinar o perfil proteico e lipídico do líquido folicular de pacientes com endometriose e endometrioma submetidos ao tratamento de fertilização in vitro determinando assim possíveis candidatos proteicos e lipídicos para a endometriose. Métodos: Amostras do líquido folicular de 10 mulheres com endometriose grau III ou IV, diagnosticadas por videolaparoscopia, e seus respectivos endometriomas ovarianos, foram coletadas. O grupo controle foi composto por 10 mulheres que tiveram sucesso na gravidez após o tratamento de fertilização in vitro. Para proteômica as amostras foram agrupadas em pools, de acordo com a concentração de proteínas das mesmas e para essa análise utilizou-se a técnica de 2D nanoUPLC-ESI-MSE. O processamento dos espectros e a identificação das proteínas, foram realizados com auxílio do software ProteinLynx Global Server v.2.5 (PLGS). As redes biológicas foram produzidas no programa Cytoscape 2.8.2 com o plugin ClueGO. Para a análise de lipidômica, realizouse a extração de lipídeos, utilizando o protocolo de Bligh e Dyer. A fase apolar foi analisada por um espectrômetro do tipo ESI-QTOF, em modo positivo e a análise estrutural dos possíveis biomarcadores foram realizadas por análise de MS/MS. Resultados: Um total de 535 proteínas foram identificadas e quantificadas. Entre as proteínas exclusivas e/ou diferencialmente expressas, 33 pertencem ao grupo Controle, 41 ao grupo Endometriose (OSE) e 212 ao grupo Endometrioma (OMA). Pela análise de enriquecimento funcional pôde-se observar no grupo OSE a presença de funções de regulação relacionadas à secreção de citocinas, processos de coagulação, transporte, ligação e metabolismo de esteroides. No grupo OMA foi possível encontrar proteínas relacionadas ao aumento dos danos de DNA, ao processo inflamatório, estresse oxidativo, apoptose e produção exacerbada de espécies reativas ao oxigênio. Na análise de lipidômica, no grupo controle foram encontradas fosfatidilglicerol fosfato, fosfatidilcolina, fosfatidilserina e fosfatidilnositol bifosfato. Nos grupos de estudo as subclasses lipídicas hiper-representas foram: fosfatidilcolina e esfingomielina. Conclusões: O perfil de proteínas e lipídeos é diferente entre mulheres com e sem endometriose. As alterações de ambos os perfis do líquido folicular mostraram que essa doença pode afetar a fisiologia folicular.
Descrição
Citação
REGIANI, Thais. Análise dos perfis proteômico e lipidômico de líquido folicular de pacientes com endometriose e endometrioma submetidas ao tratamento de fertilização in vitro. 2013. 95 f. Tese (Doutorado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2013.