Identificação de potenciais antígenos do carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus para o desenvolvimento de vacinas

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dc.audience.educationlevelMestrado
dc.contributor.advisorTanaka, Aparecida Sadae [UNIFESP]
dc.contributor.authorSilva, Fernando Allan Abreu [UNIFESP]
dc.contributor.institutionUniversidade Federal de São Paulopt
dc.date.accessioned2022-07-21T16:02:55Z
dc.date.available2022-07-21T16:02:55Z
dc.date.issued2020-07-30
dc.description.abstractThe tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus is responsible for considerable economic losses to the livestock sector. The main control method of infestation of this parasite is by acaricides and can result in the selection of resistant ticks, environment and products contamination, between other factors. The vaccine is a more sustainable alternative, but the products available on the market are not efficient in the Brazilian territory. Although the tick genome has not yet been elucidated, transcriptomes and proteomes can indicant potential targets for selection of antigens. Two proteins sequences were selected for this work, a sphingomyelinase D – like and a cathepsin A – like from a tick transcriptome. The DNA sequences that codified these two proteins were cloned into the pET14b expression vector and confirmed by DNA sequencing. The analysis of the translated amino acids of cathepsin A – like showed the absence of amino acids residues important for the activity of this enzyme when compared to others cathepsins A sequences. However, it was not possible to confirm experimentally this data since the recombinant protein was not express in bacterial system. In contrast, sphingomyelinase D – like was expressed in bacteria in large quantities, but in the form of inclusion body. The sphingomyelinase D – like was partially purified in the presence of urea. The analysis of sphingomyelinase D – like primary structure showed a replacement of a histidine for an asparagine in an important position for the enzymatic activity. Therefore, the perspective of this work is to obtain the purified sphingomyelinase D – like and carry out its biochemical and functional characterization.en
dc.description.abstractO carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus é responsável por perdas econômicas consideráveis a pecuária. O principal método de controle das infestações desse ectoparasita é pelo uso de acaricidas e que pode resultar na seleção de carrapatos resistentes, contaminação ambiental e de produtos derivados de bovinos. A vacina é uma alternativa mais sustentável, mas os produtos disponíveis no mercado não apresentam eficácia no território brasileiro. Embora o genoma do carrapato R. microplus ainda não tenha sido elucidado, transcriptomas e proteomas podem indicar alvos em potenciais para seleção de antígenos. Duas sequências de proteínas foram selecionadas para este trabalho, uma esfingomielinase D – like e uma catepsina A - like a partir de transcriptomas de R. microplus. As sequências de DNA que codificam estas duas proteínas foram clonadas em vetor de expressão pET14b e confirmadas por sequenciamento de DNA. A análise da sequência de aminoácidos traduzida da catepsina A – like mostrou a ausência de resíduos de aminoácidos importantes para a atividade desta enzima quanto comparada com outras sequências de catepsinas A. No entanto, não foi possível confirmar este dado experimentalmente, visto que esta proteína recombinante não foi expressa em sistema de bactéria. Contrariamente, a esfingomielinase D – like foi expressa em bactéria em grande quantidade, mas na forma de corpo de inclusão. A esfingomielinase D -like foi parcialmente purificada na presença de ureia. A análise da sua estrutura primária da esfingomielinase D – like apresentou uma substituição de uma histidina por uma asparagina em posição importante para a atividade enzimática. Portanto, as perspectivas deste trabalho são obter a esfingomielinase D – like purificada e realizar a sua caracterização bioquímica e funcional.pt
dc.description.sourceDados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2020)
dc.format.extent73 p.
dc.identifierhttps://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=9279209
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/11600/64285
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.subjectTicken
dc.subjectRhipicephalus Microplusen
dc.subjectSphingomyelinase Den
dc.subjectCathepsin Aen
dc.subjectVaccineen
dc.subjectCarrapatopt
dc.subjectRhipicephalus Micropluspt
dc.subjectEsfingomielinase Dpt
dc.subjectCatepsina Apt
dc.subjectVacinapt
dc.titleIdentificação de potenciais antígenos do carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus para o desenvolvimento de vacinaspt
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
unifesp.campusSão Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)pt
unifesp.graduateProgramCiências Biológicas (Biologia Molecular)pt
unifesp.knowledgeAreaBioquimicapt
unifesp.researchAreaProteases E Inibidores De Proteasespt
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PPG - Ciências Biológicas (Biologia Molecular)