Fibroblastos periodontais humanos em meio de cultura suplementado com IL-1ß no modelo de força compressiva estática continua
Data
2016-06-30
Autores
Miguel, Delaini Pires Roman 
Orientadores
Ferreira, Lydia Masako
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
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Título de Volume
Resumo
Introduction: The mechanotransduction may be a cellular differentiation mechanism for fibroblasts that are derived from the periodontal ligament as well as local inflammation may also play an important role in the molecular response of these cells. Objective: Evaluate the viability, apoptosis, necrosis and gene expression of proinflammatory markers in a continuous static compression model using a proinflammatory cell culture. Methods: We selected 10 patients that were submitted to third molars extractions to obtain 4 mm2 of periodontal tissue of the middle third of their roots. Fibroblasts were isolated and expanded until the 6th passage and cultured in proinflammatory culture (IL- 1beta 5 ng / mL ) and after this three groups were formed according to the applied load: Control Group (CG), no charge; Experimental Group 1 (SG1), continuous static compression of 3g/6h and Experimental Group 2 (SG2) continuous static compression 4g/6h. Results: The cell viability control group had higher results both experimental groups, and was not observed differences between experimental groups. The cell apoptosis was higher in the experimental group 2 compared to the control and experimental groups 1, with no differences between them. No differences were observed between the groups in relation to cell necrosis. In gene expression not detected in the TNF-alpha expression, but IL-6 expression, this expression equal among all groups. Conclusion: Human periodontal fibroblasts in culture medium supplemented with IL-1 beta in continuous static compressive force model showed decreased cell viability, increased apoptosis and necrosis showed no changes and gene expression of IL-6 and TNF-alpha.
Introdução: A mecanotransdução pode ser um mecanismo de difereciação celular para fibroblastos derivados do ligamento periodontal bem como a inflamação local pode também exercer um papel importante na resposta molecular destas células Objetivo: Avaliar a viabilidade, apoptose, necrose celular e a expressão gênica da IL-6 e TNF-alfa de fibroblastos periodontais em um meio de cultura suplementado com IL-1 beta no modelo de compressão estática contínua Métodos: Quarenta terceiros molares extraídos de10 pacientes selecionados para obtenção de 4 mm2 de tecido periodontal do terço médio das suas raízes. Os fibroblastos foram isolados, cultivados, expandidos até a 6ª passagem e suplementados com meio de cultura pró inflamatório (IL-1beta 5ng/mL). Distribuídos em três grupos conforme a carga aplicada: Grupo Controle sem carga, Grupo Experimental 1 com carga de 3g/6h e Grupo Experimental 2 com carga de 4g/6h. Os grupos foram analisados pelos métodos de Citometria de fluxo e qPCR. Resultados: Quanto a viabilidade celular o grupo controle obteve resultados maiores que ambos os grupos experimentais, e não foram verificadas diferenças entre os grupos experimentais. A apoptose celular foi maior no Grupo Experimental 2 quando comparada aos grupos Controle e Experimental 1, não havendo diferenças entre estes. Não foram observadas diferenças nos grupos em relação à necrose celular. Na expressão gênica não detectou-se a expressão de TNF-alfa, constatando a expressão de IL-6 com valores semelhantes nos grupos analisados. Conclusão: Fibroblastos periodontais humanos em meio de cultura suplementado com IL-1 beta no modelo de força compressiva estática contínua apresentaram diminuição da viabilidade celular, aumento da apoptose e não apresentaram alterações de necrose e expressão gênica de IL-6 e TNF-alfa.
Introdução: A mecanotransdução pode ser um mecanismo de difereciação celular para fibroblastos derivados do ligamento periodontal bem como a inflamação local pode também exercer um papel importante na resposta molecular destas células Objetivo: Avaliar a viabilidade, apoptose, necrose celular e a expressão gênica da IL-6 e TNF-alfa de fibroblastos periodontais em um meio de cultura suplementado com IL-1 beta no modelo de compressão estática contínua Métodos: Quarenta terceiros molares extraídos de10 pacientes selecionados para obtenção de 4 mm2 de tecido periodontal do terço médio das suas raízes. Os fibroblastos foram isolados, cultivados, expandidos até a 6ª passagem e suplementados com meio de cultura pró inflamatório (IL-1beta 5ng/mL). Distribuídos em três grupos conforme a carga aplicada: Grupo Controle sem carga, Grupo Experimental 1 com carga de 3g/6h e Grupo Experimental 2 com carga de 4g/6h. Os grupos foram analisados pelos métodos de Citometria de fluxo e qPCR. Resultados: Quanto a viabilidade celular o grupo controle obteve resultados maiores que ambos os grupos experimentais, e não foram verificadas diferenças entre os grupos experimentais. A apoptose celular foi maior no Grupo Experimental 2 quando comparada aos grupos Controle e Experimental 1, não havendo diferenças entre estes. Não foram observadas diferenças nos grupos em relação à necrose celular. Na expressão gênica não detectou-se a expressão de TNF-alfa, constatando a expressão de IL-6 com valores semelhantes nos grupos analisados. Conclusão: Fibroblastos periodontais humanos em meio de cultura suplementado com IL-1 beta no modelo de força compressiva estática contínua apresentaram diminuição da viabilidade celular, aumento da apoptose e não apresentaram alterações de necrose e expressão gênica de IL-6 e TNF-alfa.
Descrição
Citação
MIGUEL, Delaini Pires Roman. Fibroblastos periodontais humanos em meio de cultura suplementado com ii-1 beta no modelo de força compressiva estática continua. 2016. 95 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia Translacional) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2016.