Navegando por Palavras-chave "Estruturas embrionárias"

Agora exibindo 1 - 6 de 6
  • Imagem de Miniatura
    Item
    Acesso aberto (Open Access)
    Análise da variação da concentração de amônia, dos aminoácidos alanina e glutamina e do dipeptídeo alanil-glutamina no meio de cultura de embriões humanos e os efeitos na reprodução assistida
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2009-03-25) Stevanato, Juliana [UNIFESP]; Bertolla, Ricardo Pimenta [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Objective: to verify the relations between culture media concentrations of ammonia, alanine, glutamine, and alanyl-glutamine and embryo quality, pregnancy, and type of hormonal stimulation. Methods: a prospective case-control study was carried out including 62 embryos from 20 women submitted to assisted reproduction at the Sao Paulo Federal University. Inclusion criteria were age (up to 37 years old), one to four embryos transferred at day 3 of embryo culture, couples submitted to ICSI, and LH peak achieved through hCG administration. Experimental groups were subdivided according to embryo morphologic quality on days 2 and 3, homogenous (good embryos on days 2 and 3) or heterogeneous evolution, type of hormonal stimulation used (FSH or FSH and LH), and occurrence of pregnancy evaluated by serum ƒÒ-hCG. Culture media aliquots were collected after the embryos were transferred. Analysis of alanine, glutamine, alanyl-glutamine, and ammonia concentrations was performed using HPLC. Numerical variables were compared between groups using unpaired Student¡¦s T-test (heteroscedastic variables were transformed), and frequencies using Pearson¡¦s Chi-square or Fisher¡¦s exact test. Logistic models were constructed using female age, type of hormone used for stimulation, embryo quality, and the measured metabolites, in order to maximize predictability of occurrence of pregnancy. Data are presented as mean; standard deviation. Results: In the embryos transferred to women who achieved pregnancy, when compared to those who did not achieve pregnancy, lower levels of normalized glutamine (1.4; 0.7 and 1.9; 0.7, respectively, p=0.004) and ammonia (0.2; 0.01 and 0.3; 0.1, respectively, p=0.008) were observed. Higher levels or normalized alanyl-glutamine were observed in higher quality embryos on days 2 and 3, and on those who presented homogeneous evolution. Embryos from patients who received FSH with LH, when compared to those from patients who received only FSH, presented higher absolute values of alanyl-glutamine (334.9; 95.2 and 282.9; 62.4, respectively, p=0.017). In logistic regression, the model which best predicted pregnancy included all the normalized values of alanine, glutamine, age, type of hormone, and evolution (77.4% correct, p=0.00005). Conclusion: Our results allow us to conclude that, in our conditions: (i) embryos with better quality on days 2 and 3 and with a homogenous evolution are associated with higher contents of alanyl-glutamine in their culture media, (ii) lower levels of ammonia and glutamine in the culture media are associated to higher pregnancy rates, and (iii) FSH with LH during hormonal stimulation is associated to higher levels of alanyl-glutamine in the culture media.
  • Nenhuma Miniatura disponível
    Item
    Somente Metadadados
    Avaliação do desenvolvimento de embriões bovinos pós-biopsia: proposição de modelo de treinamento
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1999) Almodin, Carlos Gilberto [UNIFESP]; Moron, Antonio Fernandes [UNIFESP]
    O desejo de poder realizar o diagnostico citogenetico mais precocemente, obtendo-se informacoes precisas e seguras esta sendo possivel com o diagnostico pre-implantacao, o qual vem se somar aos procedimentos ja existentes. Para que possamos realizar o diagnostico pre-implantacao e necessario a obtencao de fragmentos dos embrioes em estudo, para que se possa analisar por meio da Hibridizacao in-situ (FISH) ou por Reacao da Polimerase em Cadeia (PCR). Desenvolvemos este trabalho objetivando montar um protocolo animal para estudo e treinamento. Realizamos procedimentos, com retirada dos ovarios de vacas em abatedouro, sem qualquer criterio de escolha das mesmas. Os ovarios apos serem assepticamente retirados foram levados encuba esteril para laboratorio de fertilizacao. Os foliculos com diametro inferior a 8 mm foram puncionados com seringa descartavel de 10 ml e agulha 21 G. Os ovocitos retirados do liquido folicular sob microscopio estereoscopio foram lavados em solucao de Dulbecco's (PBS) e transferidos para placas Nunc contendo meio de cultura para maturacao. Os ovocitos obtidos, separados para o estudo apos 24 horas de maturacao, foram fertilizados com aproximadamente l.OOO.OOO/ml de espermatozoides e mantidos em cultivo em meio de fertilizacao. Apos fertilizados, foram transferidos para placas de co-cultura com celulas vero, e mantidos em incubadora com 5 por cento CO2, 20 por cento oxigenio e 75 por cento nitrogenio a 370 C e umidade de 90 por cento , por cinco dias. Apos este periodo, separamos os embrioes com 8 ou mais blastomeros, aleatoriamente, em dois grupos. Um deles foi mantido em cultivo com o mesmo meio e mesmas condicoes para servir como grupo controle, o outro foi submetido a biopsia, com abertura da zona pelucida com lamina de corte ajustada em microscopio optico Olympus. Apos abertura da zona pelucida, retiramos l ou 2 blastomeros dos embrioes, com a utilizacao de microscopio Diaphot Nikon, micromanipuiadores Narishige MMO-204 e injetores-aspiradores IM6, com micropipetas Humagem. Em seguida a biopsia, os embrioes permaneceram em co-cultura por mais tres dias. Ao final deste tempo, avaliamos o desenvolvimento comparativamente com o grupo de controle. Foi realizado estudo morfologico dos embrioes ate o estagio de blastocito ou extrusao da zona pelucida(hatching), identificando o fenomeno de cavitacao e estreitamento da zona pelucida, e contagem do numero de celulas atraves de coloracao especificas para nucleos...(au)
  • Nenhuma Miniatura disponível
    Item
    Somente Metadadados
    Efeito da amifostina(WR-2721)sobre a fertilidade de ratos pré-puberes tratados com doxorrubicina, com ênfase na integridade do DNA dos espermatozoides e na qualidade dos embriões concebidos
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2009) Vilela, Vanessa Vendramini [UNIFESP]; Miraglia, Sandra Maria [UNIFESP]
  • Nenhuma Miniatura disponível
    Item
    Somente Metadadados
    PCR em embriões bovinos: proposição de modelos de treinamento
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2002) Almodin, Carlos Gilberto [UNIFESP]; Moron, Antonio Fernandes [UNIFESP]
    Objetivo: Desenvolver um protocolo animal de treinamento para equipe interessada em adquirir conhecimentos e destreza tecnica no manuseio de embrioes com finalidade de realizar diagnostico pre-implantacao atraves da tecnica de reacao em cadeia da polimerase (PCR). Metodos: Realizamos procedimentos, com retirada dos ovarios de vacas em abatedouro, sem qualquer criterio de escolha das mesmas. Os ovarios apos serem assepticamente retirados foram levados em cuba esteril para laboratorio de fertilizacao. Os foliculos com diametro inferior a 8 mm foram puncionados com seringa descartavel de 10 ml e agulha 21 G. Os ovocitos retirados do liquido folicular sob microscopio estereoscopio foram lavados em solucao salina tamponada (D-PBS) e transferidos para placas Nunc contendo meio de cultura para maturacao. Os ovocitos obtidos, separados para o estudo apos 24 horas de maturacao, foram fertilizados com aproximadamente 1.000.000/ml de espermatozoides e mantidos em cultivo em meio de fertilizacao. Apos fertilizados, foram transferidos para placas de co-cultura com celulas vero, e mantidos em incubadora com 5 por cento de C02, 20 por cento de oxigenio e 75 por cento de nitrogenio a 37º C e umidade de 90 por cento, por cinco dias. Apos este periodo, separamos os embrioes com 8 ou mais blastomeros, aleatoriamente, em dois grupos. Um deles foi mantido em cultivo com o mesmo meio e mesmas condicoes para servir como grupo controle, o outro foi submetido a biopsia. Apos abertura da zona pelucida, retiramos 1 ou 2 blastomeros dos embrioes, com a utilizacao de microscopio invertido e equipamento de micromanipulacao. Em seguida a biopsia, os embrioes permaneceram em co-cultura por mais tres dias. Ao final deste tempo, avaliamos o desenvolvimento comparativamente com o grupo controle. Foi realizado estudo morfologico dos embrioes ate o estagio de blastocisto ou extrusao da zona pelucida (hatching), identificando o fenomeno de cavitacao e estreitamento da zona pelucida, e contagem do numero de celulas atraves de coloracao especifica para nucleos com o intuito de comprovar a inocuidade da biopsia. Cinquenta embrioes e seus blastomeros biopsiados foram submetidos a reacao em cadeia da polimerase para identificacao do sexo. Resultados: Dos 57 embrioes biopsiados, 40 atingiram o estagio de blastocisto, (70,2 por cento) e em 11 foi observado o hatching (27,5 por cento). Nos embrioes co-cultivados para controle foram obtidos...(au)
  • Nenhuma Miniatura disponível
    Item
    Somente Metadadados
    Tratamento da gravidez cervical com metotrexato: descritiva de série de casos admitidos com embrião vivo
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2011) Musiello, Rubens Bermudes [UNIFESP]; Elito Junior, Julio [UNIFESP]
    Objetivo: Avaliar o resultado obtido no tratamento de sete casos de gravidez cervical, admitidos com embriao vivo, utilizando metotrexato local. Pacientes e Metodo: Estudo retrospectivo, descritivo, tipo serie de casos, realizado na Universidade Federal de São Paulo u Escola Paulista de Medicina, no periodo de 1996 a 2006. Os seguintes parametros foram estudados: a evolucao foi considerada satisfatoria quando a paciente recebeu alta e retornou as suas atividades habituais, sem restricoes fisicas e liberada para tentar nova gestacao; valor sanguineo da subunidade beta da gonadotrofina corionica, no momento do diagnostico; ocorrencia de morbidez; intervalo de tempo para que os titulos da subunidade beta da gonadotrofina corionica se tornassem negativos; intervalo de tempo necessario para a regressao da imagem cervical a luz da ultrassonografia; decesso materno. Resultados: Obtivemos resultado satisfatorio na totalidade dos casos. O valor sanguineo do β-hCG no momento do diagnostico variou de 3.013 a 71.199 mUI/ml. Dois dos casos apresentaram morbidez leve: estomatite ulcerativa e infeccao cervico-vaginal. O intervalo de tempo para o β-hCG tornar-se negativo variou de 2 a 12 semanas. O tempo necessario para a imagem ultrassonografica tornar-se normal foi de 3 a 14 semanas. Nao houve decesso materno. Conclusoes: O resultado obtido foi considerado plenamente satisfatorio, a ocorrencia de morbidade foi excepcional e nao houve decesso materno. Os titulos do β-hCG tornaram-se negativos em no maximo 12 semanas; enquanto que a imagem, cervical a luz da ultrassonografia transvaginal demorou ate 14 semanas para apresentar-se como normal
  • Imagem de Miniatura
    Item
    Acesso aberto (Open Access)
    Volume do embrião estimado pela ultra-sonografia tridimensional entre a sétima e a décima semana de gestação
    (Federação Brasileira das Sociedades de Ginecologia e Obstetrícia, 2008-10-01) Bortoletti Filho, João [UNIFESP]; Nardozza, Luciano Marcondes Machado [UNIFESP]; Araujo Júnior, Edward [UNIFESP]; Rôlo, Líliam Cristine; Nowak, Paulo Martin [UNIFESP]; Moron, Antonio Fernandes [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    PURPOSE: to evaluate the embryo's volume (EV) between the seventh and the tenth gestational week, through tridimensional ultrasonography. METHODS: a transversal study with 63 normal pregnant women between the seventh and the tenth gestational week. The ultrasonographical exams have been performed with a volumetric abdominal transducer. Virtual Organ Computer-aided Analysis (VOCAL) has been used to calculate EV, with a rotation angle of 12º and a delimitation of 15 sequential slides. The average, median, standard deviation and maximum and minimum values have been calculated for the EV in all the gestational ages. A dispersion graphic has been drawn to assess the correlation between EV and the craniogluteal length (CGL), the adjustment being done by the determination coefficient (R²). To determine EV's reference intervals as a function of the CGL, the following formula was used: percentile=EV+K versus SD, with K=1.96. RESULTS: CGL has varied from 9.0 to 39.7 mm, with an average of 23.9 mm (±7.9 mm), while EV has varied from 0.1 to 7.6 cm³, with an average of 2.7 cm³ (±3.2 cm³). EV was highly correlated to CGL, the best adjustment being obtained with quadratic regression (EV=0.2-0.055 versus CGL+0.005 versus CGL²; R²=0.8). The average EV has varied from 0.1 (-0.3 to 0.5 cm³) to 6.7 cm³ (3.8 to 9.7 cm³) within the interval of 9 to 40 mm of CGL. EV has increased 67 times in this interval, while CGL, only 4.4 times. CONCLUSIONS: EV is a more sensitive parameter than CGL to evaluate embryo growth between the seventh and the tenth week of gestation.